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Diagnostique des Bactéries Gram Négatives d’Importance Médicale

Diagnostique des Bactéries Gram Négatives dImportance Médicale

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Page 1: Diagnostique des Bactéries Gram Négatives dImportance Médicale

Diagnostique des Bactéries Gram Négatives d’Importance

Médicale

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Bactérie Gram Négatives Representatives

• Cocci Gram-negative– Neisseria gonorrhoea;

– Neisseria meningitis

• Bacilles Gram-negatifs– Famille Enterobacteriaceae

• Escherichia coli, Salmonella enterica, Shigella, Klebsiella spp, Proteus spp

– Famille Pseudomonaceae• Pseudomonas spp

– Autres• Morganella morganii

-Flore naturelle du tractus intestinal - Anaérobies facultatif- Oxydase negative- Fermentent le glucose

- Résidents naturels des sols et des eaux-Aérobies strictes- Oxydase positive- Non-fermenteurs

- Flore naturelle des membranes muqueuses des tractus respiratoires et génitaux- Anaérobies facultatifs- Oxydase positive- Fermentent le glucose

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Identification des Gram -Oxydase

PseudomonaceaeNeisseriaceae

Fermentation du glucose

PseudomonaceaeNeisseriaceaeEnterobacterEscherichiaKlebsiella

SerratiaProteusSalmonellaShigella

+ -

+-+

Fermentation du lactoseMcConkey-

EnterobacteriaceaeMorganella

Respiration aérobie

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Identification des Gram - Lactose +Indole

Escherichia

Citrate (-)

EnterobacterKlebsiella

Enterobacter Klebsiella

+ -

-+

Citrate (+)

Motilité

Quelle est la source de C?

Tryptophane

Quelle est la source de C?

Citrate

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Identification des Gram - Lactose -H2S

ProteusSalmonella

Uréase

ShigellaSerratia

Serratia Shigella

+ -

-+

Citrate &Acide de sucrose

Proteus Salmonella

-+

Quelle est la source de C?

CystéineQuelle est la source de N?

Urée, donc protéine utilisé

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Test Métaboliques pour l’Identification des Gram -

• MacConkey– Milieu sélectif et différentiel– Prévient la croissance de Gram +– Fermentation du lactose (colonies rose,

non-fermenteurs sont incolorées)

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Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite)

• TSI– Trois sucres

• Glucose (limitant)

• Sucrose

• Lactose

– Protéines• Cystéine

– Indicateur• Phénol rouge

Combine de sources de C sont possible?

Qu`est-ce qui est arrivé ici?

#1. Utilise toujours le glucose en 1ier = source de C préféré!

#2. Choisissent entre lactose, sucrose, protéine.

#3.Si protéine utilisé Rxn alkaline(orange) Si sucre utilisé Rxn acidique (jaune)Si utilisé aérobie jaune en haut.Si utilisé anaérobie jaune en bas.

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Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite)

• SIM– Milieu semi-solide

• Permet de visualiser la motilité

– Métabolisme de la cystéine

CystéineH2S; H2S+ FeSO4 Précipité noir

– Métabolisme du tryptophane

(A) TryptophaneIndole+NH4 + Pyruvate

(B) Indole+Réactif de Kovac Rouge

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Non-inoculé

Non-motile

H2S et motile

Indole+ -

Nom du réactif utilisé?

Quel utilise le tryptophane?

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Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite)

• Citrate– Source de carbone unique:

• Citrate

• Indicateur– Bromthymol bleu

• Utilisation du citrate génère des produits alcalins– Change du vert au bleu

Seulement 1 source de carbone possible.

Quel produit change la couleur à bleu?

E. coli = (-)Enterobacter and Klebsiella = (+)

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Multi Test: Enteropluri-test

• Tubes de tests métaboliques multiples– Utilisation d’un inoculum constant

– Rapide

– Lecture peut être automatisé

– Préparations et inconsistances normalisé

Quel famille bactérienne est testé?

Enterobacteriaceae

PERCER DES TROUS ICI

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Voir le vidéo au lien suivants:

http://www.youtube.com/watch?feature=player_detailpage&v=l5qHyr1FULE

Extra:

https://www.youtube.com/watch?v=wWj5LvLSHD8