LA GALERIE API 20E (travail de Roland FERRY CANNES)

1- Présentation de la galerie

Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE.

cupule

microtube contenant le milieu déshydraté

La suspension bactérienne introduite dans le tube dissout les substrats déshydratés.

2- Préparation de l’inoculum

Prélèvement d’une souche pure

sur GNI

1 seule colonie sur GO

5 mL d’eau distillée stérile

isolement

Souche pure sur GNI

LA GALERIE API 20E

3- Ensemencement de la galerie API 20 E

Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur stérile ouverte, pointe appuyée à l’intérieur et sur le côté pour éviter la formation de bulles

Pour certains caractères:

Remplir le tube de suspension puis recouvrir d’huile de paraffinePour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE

LA GALERIE API 20E

Remplir de suspension le tube et la cupulePour les tests :

CIT VP GEL

LA GALERIE API 20E

4- Lecture de la galerie API 20 E

Après 24h d’incubation à 37°C, dans quelles cupules doit-on rajouter des réactifs ?

Napht-1-ol Naphtyl-1-amine

Chlorure de fer III

4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests

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+ Réactif TDA

+ Réactif Kovacs

+ Réactifs VP 1 et 2

+ Réactif TDA

+ Réactif Kovacs

+ Réactifs VP 1 et 2

Tests négatifs

Tests positifs

Tests négatifs

Tests positifs

Après ajout des réactifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +)

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4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests

TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISÉE API 20E

Microtube Substrat : Caractère recherché : RévélateurLecture directe ou indirecte

Test (si nécessaire)Résultat

-Résultat +

ONPGONPG = Ortho-Nitro-Phényl-Galactoside

ADHLDCODC

ArginineLysineOrnithine

CIT Citrate

H2SThiosulfate de sodium

URÉ Urée

TDA Tryptophane

IND Tryptophane

VPPyruvate de sodium

GEL Gélatine

GLU à ARA

= zymogramme

Substrat carboné (glucide)

NO2- / N2 Nitrates (NO3

-)

Beta galactosidase

Lecture directe

Arginine DihydrolaseLysine DécarboxylaseOrnithine Décarboxylase

BBT

Rouge de Phénol

Lecture directe

Lecture directe

Lecture directe

Lecture directe

Lecture directe

Utilisation du citrate

Production d’H2S

Uréase Rouge de Phénol

Tryptophane désaminase

Tryptophanase ou production d’indole

production d’acétoïne (3-hydroxybutanone

gélatinase

Utilisation de substrats carbonés (glucides)

Nitrate réductase

BBT

Lecture directe

Lecture indirecteAjouter une goutte de réactif chlorure de fer III Lecture indirecteAjouter une goutte de réactifKovacsLecture indirecteAjouter 1 goutte de VP1 et VP2 Attendre 10 minutes

Lecture indirecteAjouter 1 goutte de NIT1 et NIT2 et zinc éventuellement

5 2 1 5 7 7 3 5

+ +-

Code n°: 5 215 773 (55)

++

5

5- Identification de la souche

Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code

Résultats de la galerie :

Résultats reportés sur la fiche d’identification

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