La gestion des déchets Biochimie

Laurence Chavant

Gestion des déchets lors d’une séance de Tp de Biochimie

Gestion des déchets niveau de la commande

Repérage des déchets : leur nature

Traitement possible des déchets au lycée ?

(Protocole élimination des déchets)

Oui

• Rapide / simple : Elève durant séance

• Long / complexe : Personnel de laboratoire

Sur la commande :

Les besoins pour le traitement :

- Matériels

- Réactifs

Non

Stockage dans « Bidons » avec étiquette appropriée

(Aide au tri des déchets chimiques)

Sur la commande :

- Nombre de « bidons ».

- L’étiquette appropriée avec nom du composé.

Documents destinés aux élèves

Fiche technique « Détermination de l’étiquette présente sur le bidon ».

Dans la salle : « Aide au tri des déchets chimiques »

Sur protocole : Symbole : Devenir des produits sur la paillasse.

Tableau : Elimination des déchets de l’analyse à compléter.

Gestion des déchets par les élèves

Devenir des produits sur la paillasse

Produit à remettre dans le flacon initial

Symboles dans le protocole

Repérage des déchets de la manipulation

Gestion des déchets par les élèves

Elimination des déchets de l’analyse

Tableau à compléter

Les déchets Moyens d’élimination

Répérage : Lieu de production

Protocole Nature du déchet

Principe

Traitement : Oui : Décrire le moyen Non : « Bidon » avec étiquette appropriée

Gestion des déchets par élèvesExemple : Dosage des chlorures

Le protocole :

- Etalonnage de la solution nitrate d’argent par méthode de Mohr : pesée indirecte

- Dosage des chlorures par méthode de Charpentier et Volhard.

Exemple : Dosage des chlorures

Evier

Etalonnage : AgNO3 par la méthode de Mohr, pesée indirecte

Les déchets Moyens d’élimination

NaCl

AgCl en milieu neutre

Laisser sédimenter le précipité une nuit :

- Surnageant : évier

- Précipité : « Bidon » déchet inorganique toxique : Ag+

Exemple : Dosage des chlorures

Dosage : Chlorure par la méthode de Charpentier et Volhard

Les déchets Moyens d’élimination

AgCl AgSCN

milieu acide

Neutralisation et sédimentation Dégagement vapeurs irritantes

« Bidon » déchet inorganique toxique : argent, thiocyanate et milieu acideNH4SCN (burette)

AgNO3 (burette et pipette jaugée)

Lavage verrerie thiosulfate

Gestion des déchets : Réduction de volume

Quelques pistes

Diminution volume en colorimétrie Essais en diminuant proportionnellement l’ensemble des réactifs et étalon de la méthode colorimétrique.

Méthode Littérature PratiquéMéthode 3,5DNS

Etude B-fructosidase

- 3 mL milieu enzymatique

- 2 mL 3.5 DNS

- 15 mL d’eau distillée

- 1,5 mL milieu enzymatique

- 1 mL 3.5 DNS

- 7,5 mL d’eau distillée

Dosage des nitrites (diazotation)

- 10 mL (étalon et diluant)

- 0,2 mL réactif

- 5 mL (étalon et diluant)

- 0,1 mL réactif

Dosage du Phosphore

Méthode de Briggs

- 7 mL (étalon et diluant)- 1 mL Réactif 1- 1 mL Réactif 2- 1 mL Réactif 3

- 2 mL (étalon et diluant)- 2 mL triréactif (V/V/V)

Diminution des déchets : CCM des acides aminés Solvant :

Volume préparé nécessaire à 2 groupes de 16 élèves (1L). Récupérer et stocker en flacon fermé. Utiliser par les groupes suivants dans la semaine.

Révélateur à la ninhydrine (pinceau)    Composition : 0,6 g de ninhydrine

6 mL d’acide éthanoïquen-butanol qsp 200 mL

En flacon brun fermé le réactif est stable plusieurs mois à + 4°C .

Dimension des plaques : CCM (« secondaire ») Séparation des AA lors chromatographie échange d’ions/Identification

des AA par CCM : plaque de 4 cm x 4cm

Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate d’ammonium

Préparation de la fraction « globulines » - Dans un tube à centrifuger, placé dans de la glace, introduire : - 5 mL de sérum - 5 mL de sulfate d’ammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 10 min à 4500 rpm (Jouan , E96).

- Dans un tube Eppendorf de 1,5 mL , placé dans de la glace, introduire : - 0,5 mL de sérum dilué (= Unitrol dilué au ½) - 0,5 mL de sulfate d’ammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 5 min à 10 000 rpm (microcentrifugeuse).

La fraction obtenue est la fraction de globuline. On cherche à obtenir un volume total proche de 1 mL Noter le volume exacte obtenu soit VG.

Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate d’ammonium

Dosage des protéines par la méthode au Biuret 1 mL de solution étalon ou fractions à doser. 4 mL de réactif du biuret.

0,5 mL de solution étalon ou fractions à doser. 2 mL de réactif du biuret.