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S/Abdessemed S/Abdessemed Par S / Abdessemed La numération des globules blancs

Numeration des gb

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numération des globules blancs

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La numération des globules blancs

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But 

• Déterminer le nombre de GB présent dans un volume de sang total, soit le nombre de GB contenu dans un litre de sang.

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Principe

• Le comptage au microscope optique à l’état frais des GB contenus dans un volume précis de sang dilué.

• Le diluant utilisé est le lazarus qui lyse les érythrocytes et laisse les leucocytes intactes.

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 Réactifs 

Lazarus :• Bleu de méthylène……………………0,25g• Acide acétique………………………..5 ml• Eau distillé………………………qsp : 100 ml Le bleu de méthylène est censé colorer les noyaux

des leucocytes. En réalité, cette coloration n’est pratiquement pas observable et reste inutile du fait de la réfringence des GB .en fait la coloration de la solution à l’avantage de la différencier du liquide de marcano Sang veineux ou capillaire recueilli sur EDTA.

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Matériel Pipette de dilution de Potain pour GB (la bille est blanche)

Hématimètre de malassez

microscope

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Technique• bien agiter le flacon de sang.• La dilution se fait dans la pipette qui est au

1/20 (380µl de lazarus +20µl de sang).• Homogénéiser le contenu de la pipette de la

même manière que pour les GR.• Laisser reposer 2 à 3minutes pour permettre

aux globules de se déposer.• Compter le nombre de GB présent dans 4

bandes (l’écart ne doit pas dépasser 10 éléments)

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Calcul

GB/mm3 = N/4 x 20 x10N : le nombre compté dans les 4

bandes.• 20 : le coefficient de dilution.• 10 : le nombre de bandes dans

l’hématimètre

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Valeurs normales 

Adultes………………………….4.0 à 10x103 /mm3

Nouveau né……………………9.0 à 30x103/mm3

Enfant à1 an…………………6.0 à 17,5 x103/mm3

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Variations physiologiques 

• Plusieurs facteurs peuvent faire varier le nombre de GB, tels l’âge, l’effort, le stress, etc.

• Le nombre de GB est normalement plus élevé à la naissance qu’a l’âge adulte

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• Au repos physique et mental complet, on a pu observer un chiffre plus bas de GB que celui que l’on retrouve au cours des activités quotidiennes normales, des efforts intenses peuvent produire une hausse significative pouvant atteindre des chiffres voisins de 15 x 103 /mm3 dans l’heure qui suit l’exercice.

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 Valeurs pathologiques 

On peut observer une augmentation des GB ou hyperleucocytose soit réactionnelle : dans les infections bactériennes (à Cocci surtout).

dans certaines intoxications (plomb, mercure etc.), Lors du choc opératoire, etc.,

Soit maligne : par prolifération des cellules d’une ou plusieurs lignées de la moelle (leucémie) avec ou sans défaut de maturation.

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• On trouve une diminution du nombre de GB ou leucopénie lors d’une insuffisance ou d’une aplasie de la moelle, qui peut être héréditaire (agranulocytose),

• ou acquise comme dans certaines infections virales (rougeole, rubéole), ou bactériennes (typhoïde, brucellose),

• après une intoxication (benzol, radiation, médicaments, insecticides herbicides)

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