mykosen 18 (1) 25-28 0 Grosse Verlag 1975

Eingegangen am 6. November 1974

Action antifungique du Bay b 5097 sur la coccidioidomycose experimentale chez la souris*

R. VANBREUSEGHEM, CH. DE VROEY, M. TAKASHIO DANIELLE SWINNE-DESGAIN’)

Dans un travail antkrieur (1974) R. VANGREUSEGHEM, CH. DE VROEY, M. TAKASH:~, JACQUELINE COREMANS-PELSENEER et DANIELLE SWINNE-DESGAIN, ont ktudik l’action antifungique du Bay b 5097, in vitro, sur diverses espkces de champignons pathogknes et, in vivo, chez la souris, dans la sporotrichose, la cryptococcose, la basidiobolomycose et la coccidioi‘domycose experimentales.

Les rksultats in vitro montrent que la MIC2) prksente de larges variations d’une espPce fongique B l’autre, voire d’une souche A l’autre. En gknkral la MIC 73) et la MIC 144) sont le 10 pg/ml ou moins.

Les rksultats des essais in vivo peuvent &re resumes de la fason suivante:

1) Dans la sporotrichose expkrimentale de la souris, malgrk une MIC assez klevke (MIC 7 et MIC 14 sont supkrieures B 10 &ml), le Bay b 5097 exerce une activitk thkra- peutique qui n’a cependant pu &re mise en kvidence que par une difference significative dans le cours de la courbe de mortalitk.

2 ) L’activitk thkrapeutique du Bay b 5097 dans la cryptococcose expkrimentale de la souris n’a pu &tre mise en kvidence, malgrk une MIC favorable (MIC 7 et MIC 14 kgalent 5 et 10 pg/ml).

3) Dans la basidiobolomycose expkrimentale de la souris l’action thkrapeutique du Bay b 5097 semble nulle. I1 faut noter que la MIC 7 est de 10 pgiml et la MIC 14 de plus de 100 pg/ml.

4) Etant donnk, en premier lieu, que la coccidioi‘domycose expkrimentale est facile b reproduire chez la souris de fason rkgulikre et cela dans un dklai court, et en second lieu que de Coccidioi’des immitis est trks sensible in vitro au Bay b 5097 (MIC 7 est infkrieure A 1 pg/ml chez trois des souches et kgale A 2 pg/ml chez une autre souche), quatre series d’essais de l’action du Bay b 5097 in vivo sur ce champignon ont k t k rkaliskes.

Dans ces essais l’effet favorable du Bay b 5097 sur la coccidioi‘domycose expkrimentale n’apparut que partiellement en ce qui concerne la mortalitk. Cependant les autopsies pratiqukes peu de temps aprks l’interruption du traitement dkmontraient, avec des valeurs parfois significatives, l’action thkrapeutique du Bay b 5097.

Suite A ces dernikres constatations nous avons repris un essai semblable sur un nombre beaucoup plus klevk de souris avec l’espoir d’arriver B des conclusions plus nettes.

Les rksultats que nous rapportons ici dkmontrent nettement que le Bay b 5097 exerce une action thkrapeutique dans la coccidioi’domycose expkrimentale de la souris blanche.

‘k

l) Institut de Mkdecine Tropicale Prince Lkopold, 155, Nationalestraat, 20C0, Anvers, Belgique. 2, MIC: concentration minimale inhibitrice. $) MIC 7: concentration minimale inhibitrice aprks 7 jours. 4, MIC 14: concentration minimale inhibitrice aprks 14 jours.

DCdicack au Prof. Dr. H. GOTZ A l’occasion de son 6 0 i i m e anniversaire.

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Materiel et Methodes La souche de C. irnrnitir utiliske (RV. 15286) a une MIC 7 de 2 yg/ml, une MIC 14 de

4 g / m l et une IIC?) 14 de 1 &ml (VANBREUSEGHEM et al. 1974). L‘inoculation se fait par la voie intrapkritonkale. La dose inoculke est de 100.000 Clkments myckliens ou sporu- 16s par souris.

Les 120 souris blanches, mhles, utiliskes, de race indCterminCe, et hgkes de 4 semaines, sont divides en deux groupes:

a) 60 souris constituent le groupe Bay b 5097; le Bay b 5097 a ktk administrk raison de deux doses de 75 mg/kg par jour. La premiere dose de 75 mg/kg est administrke le jour de l’inoculation, la dernikre dose, c’est B dire la 14e, le 8e jour.

b) 60 souris constituent le groupe tkmoin.

Mode &administration Le Bay b 5097, dissout dans 2 g de dimCthylformamide, est mklangk 2I de la gClose

glucoske (agar-agar 1 % et glucose 5 % et eau distillke q.s. 100 ml) de fagon B ce que 0,05 ml corresponde B une dose de 75 mg/kg souris. On administre deux fois 0,05 ml par jour - sauf le Ier et le 8e jour oh l’on n’administre qu’une fois 0,05 ml avec une seringue B tuberculine introduite au fond de la cavitC buccale de la souris.

Evaluation des rdsultats Le 12e jour, c’est B dire, 4 jours apres la fin de l’administration du Bay b 5097, toutes

les souris ont Cte tuCes et autopsikes. Un examen soigneux a Ctk fait dans les deux groupes pour comparer les lksions produites. Celles-ci consistent en nodules de dimensions variables (de 1 B 5 mm de diametre), blanchhtres, isolks ou en masses.

1. Examen d frais L‘examen macroscopique montre des lksions au niveau du point d’inoculation, dans le

foie, la rate, les reins, les poumons et au voisinage du pancreas dans le diaphragme et le pkritoine.

La nature coccidioidomycosique est confirmke par la prksence de divers stades de C. immitis, observes B l’examen microscopique 2I frais. Dans la plupart des cas des sphCru- les mQres ont e tk retrouvkes.

2. Examen histologique Seuls les poumons on ktC examinks histologiquement; en effet c’est chez eux seulement

que l’examen a frais ktait rest6 nCgatif. De chaque souris le pournon gauche fut fixk dans du Bouin et des coupes furent colordes au Gridley et A 1’Hkmatoxyline-Eosine, le poumon droit ayant kk utilisC pour l’examen B frais.

Resultats La comparaison entre les groupes de souris traitkes par le Bay b 5097 et le groupe de

souris tkmoins du point de vue du dkveloppement des ICsions, est rksumCe dans la Tableau 1. I1 y a une diffCrence entre les deux groupes dans tous les endroits examines: l’kvolution de la coccidioi’domycose expkrimentale est plus avancke chez le groupe tkmoin que chez le groupe Bay b 5097.

La diffkrence entre les deux groupes est statistiquement significative pour chaque endroit examink, sauf au niveau de la cavitk pkritonkale. Dans tous les cas l’examen

’:.) La IIC, ou Initial Inhibitory Concentration, est la concentration minimale exergant une inhi- bition partielle A un moment donnk, ici a p r h 14 jours.

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Action antifungique du Bay b 5097 sur la coccidioi'dornycose experirnentale chez la souris 27

Tableau 1: Lesions observkes a l'autopsie des souris

Localisation Degrk des LCsions(") / - / o u + + o u + +

Groupe DiffCrence Statistique (x?)

Point d'inoculation Bay b 5097 Tkmoin

Pkritoine Bay b 5097 Tkrnoin

Au niveau du p a n d a s Bay b 5097 Tkmoin

Rate

Foie

Reins

Bay b 5097 Tkmoin

Bay b 5097 TCmoin

Bay b 5097 Tkmoin

Diaphragme Bay b 5097 TCrnoin

30160 6 / 6 0

59 /60 55 /60

52 /60 30 /60

57 /60 43 /60

59 /60 50 /60

60160 52 /60

52 /60 30/60

30160 54 /60

1 / 6 0 5 / 6 0

8 / 6 0 30160

3 / 6 0 1 7 / 6 0

1 / 6 0 10 /60

0 / 6 0 8 / 6 0

8 / 6 0 30 /60

significative x* = 22,9

non significative (**) 2 p = 0,2

significative x' = 18,6

significative x2 = 11,s

significative x* = 8,l

significative (* *) 2 p = 0,006

significative x* = 18,6

+) /-/ = absence de lesions, ? = lCsions douteuses, + = lCsions rares ou petites, + + = lksions nornbreuses ou Ctendues.

':':.) Le test du X* ne peut valablcrnent Ctre utilisC pour les valeurs observkes. Nous avons appliquk la mCthode exacte des probabilitbs, basCe sur les diffbrentes configurations.

macroscopique des poumons paraissait normal. Ceci est confirm6 par les examens histo- logiques: C. irnmitis n'est retrouvk qu'une fois sur 30 poumons dans chacun des deux groupes. L'infection expkrimentale a ktk arrttke (12e jour) avant le stade d'envahissement pulmonaire qui est le stade terminal de la coccidioi'domycose expkrimentale de la souris (VANBREUSEGHEM et al. 1974).

Discussion et Conclusions

D'apr2s les rksultats prksentks ici, il est kvident que le Bay b 5097 exerce un effet thkra- peutique vis B vis de la coccidioi'domycose expkrimentale .&ez la souris. Le Bay b 5097 retarde, en effet, fortement l'kvolution de cette infection expkrimentale.

Mais cet effet thkrapeutique n'apparait que partiellement dans les conditions de nos expkriences, puisqu'on retrouve des sphkrules de C. immitis chez 55 sur 60 des souris traitkes au Bay b 5097.

Nous ne pouvons pas juger bien entendu des effets d'un traitement prolong4 s'il pouvait se faire.

Summary

The oral administration of 75 mg/kg Bay b 5097, twice a day, during 8 days at white mice, intraperitoneally infected with C. immitis, has a clear therapeutic activity. However it could be correlated only with a delay in the progress of the experimental disease and

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with a lesser rate of involvement in the treated animals (60) as compared with the control group (60).

Resume

L’administration orale de deux doses journalikres de 75 mg/kg de Bay b 5097, pendant 8 jours 21 des souris blanches infectkes par voie intrapkritonkale avec C. immitis, a une action thkrapeutique certaine. Celle-ci ne se rnanifeste cependant que par un retard dans l’kvolution de la mycose expkrimentale et par l’importance moindre des lksions chez les animaux traitks (60) par comparaison avec ce que l’on observe dans le groupe tkmoin (60).

Zusammenfassung

Die zweimalige Gabe von 75 mgikg Bay b 5097 (Clotrimazol) bei weiflen Mausen uber acht Tage, die intraperitoneal mit C. immitis infiziert wurden, hat eine gewisse therapeuti- sche Wirkung. Sie besteht hauptsachlich in einer Verzogerung dieser experimentell herbei- gefuhrten Erkrankung mit einer geringeren Anzahl von Krankheitsherden in den behan- delten Tieren (60) im Vergleich zur Kontrollgruppe (60).

RCfCrences

VANBREUSEGHEM, R., CH. DE VROEY, M. TAKA- DANIELLE SWINNE-DESGAIN : Erste Erfahrun- SHIO, JACQUELINE COKEMANS-PELSENEER & gen rnit Bay b 5097. Mykosen (sous prcsse).

Anschr. d. Verf.: Prof. Dr. R. VANBREUSEGHEM, Institut de MCdecine Tropicale Prince LCopold, 155, Nationalestraat, 2000, Anvers, Belgique.

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