S632 CARD 2013

Stratum corneum (SC) est le produit final de la différenciationépidermique. Cette structure composite en constant renouvelle-ment remplit la fonction primordiale de barrière de perméabilité.En même temps, le SC garde les traces des évènements passésqui se sont déroulés dans les couches supérieures de l’épidermevivant. Nous démontrons que cette information peut être exploitéepour une meilleure compréhension des processus physiologiques etpathologiques intervenant dans l’épiderme. Les jonctions serrées(JS) sont des structures éphémères présentes dans la couche gra-nuleuse mais peuvent être rapidement modulées. Contrairement àl’étude des JS dans l’épiderme vivant, les structures jonctionnellesimmobilisées dans le SC par l’action des transglutaminases peuventêtre facilement visualisées en microscopie électronique à transmis-sion. Nous avons quantifié ces structures dans le SC de la peau nativeet dans l’épiderme reconstruit soumis au traitement topique par1 % acide salicylique. L’augmentation du nombre des séquelles deJS après traitement indique la participation des JS, en deuxièmeligne de défense, lors de l’agression perturbant l’étanchéité dela barrière principale du SC. Les observations du SC dans peelingskin disease suggèrent compensation partielle de la fragilité liée àl’absence de la cornéodesmosine. De manière similaire, l’incidenceaccrue de résidus des JS peut contribuer à l’hyperkératose présentedans le syndrome NISH/IHSC dû à l’absence de la claudine-1.

http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.574

Session 2 : Cellulessouches—cicatrisation—vieillissement

C7Impaired epithelial differentiation ofinduced pluripotent stem cells fromEEC patients is rescued byAPR-246/PRIMA-1MET

I. Petit a,∗, E. Aberdam a,b, R. Shalom-Feuerstein b, D. Aberdam a,b

a Inserm U976, university Paris-Diderot, Paris, Franceb Rappaport Faculty of Medicine, Technion, Haifa, Israel∗ Corresponding author.

Keywords : Ectodermal dysplasia ; p63 ; Pluripotent stem cellsEctodermal dysplasia is a group of congenital syndromes affectinga variety of ectodermal derivatives. Among them, ectrodactyly,ectodermal dysplasia and cleft lip/palate (EEC) syndrome is causedby single point mutations in the p63 gene, which controls epithe-lial development and homeostasis. Phenotypic defects of the EECsyndrome include skin defects and limbal stem cell deficiency. Inthis study, we designed a novel cellular model that recapitulatedmajor embryonic defects related to EEC. Fibroblasts from healthydonors and EEC patients were reprogrammed into induced pluri-potent stem cell (iPSC) lines. EEC-iPSC from both patients showedearly ectodermal commitment but failed to further differentiateinto epidermis/limbus or corneal epithelial cells. APR-246 (PRIMA-1MET), a small compound that restores functionality of mutant p53 inhuman tumor cells could revert corneal epithelial lineage commit-ment and reinstate normal p63-related signaling pathway. Althoughthere is no suitable animal model for EEC syndrome, there are seve-ral arguments that APR246 treatment can directly be evaluated onthe cornea in humans. First, the cornea is an ideal tissue for therapydue to its ease of access. Second, the cornea epithelium is avas-cular, creating a privileged site suitable for transplantation. Third,successful restoration of vision in human patients is easy to monitor.Fourth, the visual impairment of EEC patients appears at advancingage, allowing treating patients before the genesis of the symptom.Fifth, APR246 drug has been already tested in clinical trials on can-

cer patients, strongly suggest that the administration of the druglocally as eye drops should be as safe as possible.

http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.575

C8Caractérisation des cellules souchesinitiatrices au sein des naevuscongénitauxR. Fontaine a,∗, C. Charbel a, N. Kadlub b, A. Coulomb c,A. Picard b, S. Aractingi a,d, S. Guégan a,e

a Inserm, UMRS 938, faculté de médecine Paris-VI, Paris, Franceb Service de chirurgie plastique, hôpital Necker, Paris, Francec Service d’anatomie pathologique, hôpital Trousseau, Paris,Franced Service de dermatologie, hôpital Cochin, Paris, Francee Service de dermatologie, hôpital Tenon, Paris, France∗ Auteur correspondant.

Mots clés : Naevus congénital ; Mélanocytes ; Cellules souchesLe naevus congénital (NC) est une prolifération mélanocytairebénigne à risque de transformation maligne en mélanome.L’ontogénie de cette prolifération restant mal comprise, nous avonscherché à mettre en évidence la présence de cellules souches ini-tiatrices au sein de cette tumeur. Dix enfants atteints de NC degrande taille et 5 adultes atteints de mélanome à extension super-ficielle ont été inclus dans l’étude. In vivo, au sein des NC degrande taille, les cellules expriment des marqueurs mélanocytairesassociés à des marqueurs souches. Des prélèvements standardisésde NC ont été xénogreffés dans la graisse brune dorsale de sou-ris immunodéprimées Rag2—/−. Après 7 mois, une augmentation detaille d’un facteur 4 des xénogreffes tissulaires a été constatée. Deplus, des mélanocytes BrdU+ présents au sein de ce tissu néo-formés’organisent suivant une architecture en thèques comparable à celledu naevus initial greffé. Des résultats similaires ont été obtenus eninjectant des suspensions cellulaires de mélanocytes et de kérati-nocytes immortalisés. In vitro, les cellules isolées à partir de cesNC sont capables de former des colonies et de s’auto-renouveler.Environ une cellule sur 250 initie la formation d’une colonie. Ainsi,nos travaux démontrent que certains sous-types de cellules deNC possèdent des caractéristiques de cellules souches initiatriceset coopèrent avec les kératinocytes adjacents pour former cettetumeur.

http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.576

C9Rôle de XPC dans la protection contrele développement de cancers cutanésS. Rouanet a,∗, Y. Gache a, E. Warrick b, F. Bernerd b, F. Larcher c,M. Del Rio c, T. Magnaldo a

a IRCAN, Nice, Franceb L’Oréal recherche et innovation, Clichy, Francec CIEMAT, Madrid, Espagne∗ Auteur correspondant.

Mots clés : Xeroderma pigmentosum ; Thérapie génique ; Cellulessouches de la peauLes cellules souches somatiques sont à l’origine du renouvelle-ment des tissus, de leur cicatrisation lors de blessures et sont trèsprobablement à l’origine de cancers, notamment lorsqu’elles sontexposées aux agents génotoxiques. Ainsi, les ultraviolets (UV) dela lumière solaire sont à l’origine de la très grande majorité descancers de la peau. Le système de réparation de l’ADN par excisionde nucléotides (NER) élimine les lésions introduites dans l’ADN parles UV. Le xeroderma pigmentosum (XP) est une maladie génétiquerare, due à une déficience constitutionnelle de la NER associantune forte photosensibilité à une susceptibilité au développement