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Posters / Transfusion Clinique et Biologique 20 (2013) 295–369 343 Pendant cette longue période d’aplasie, nous avons du sélectionner et convoquer des donneurs de CP HLA compatibles en région Rhône-Alpes et au niveau national. Ce cas illustre la nécessité d’une étroite collaboration entre les différents services de l’EFS que sont le laboratoire HLA, le service de prélèvement, la gestion des stocks et la distribution permettant une prise en charge optimale et personnalisée des patients. http://dx.doi.org/10.1016/j.tracli.2013.03.181 P172 Protocole de prise en charge transfusionnelle d’une hémorragie massive en réanimation-déchocage au CHU de Grenoble C. Giroux-Lathuile a , J. Brun b , M. Franc ¸ois a,, S. Anselme-Martin a , P. Albaladejo b a EFS Rhône Alpes, Grenoble, France b CHU de Grenoble, Grenoble, France Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (M. Franc ¸ois) Le CHU de Grenoble accueille une activité importante de traumatologie lourde associée à des hémorragies massives. L’éloignement relatif de site EFS (cinq minutes à pied) nous oblige à une réflexion quant à la mise à disposition de PSL en UVI avec la mise en place de pré-conditionnement de CGR thermotracés en valises isothermes. Afin d’optimiser la prise en charge des hémorragies massives en réanimation- déchocage tout en diminuant les destructions de PSL, un protocole « reflexe » a été initié. Ce protocole définit des séquences transfusionnelles avec pré-conditionnement des PSL par l’EFS : – pack 1 : quatre CGR O + ou O– ; – pack 2 : quatre CGR O + ou O–, quatre PFC, un concentré plaquettaire ; – pack 3 : quatre CGR O + ou O–, quatre PFC. La poursuite du protocole se fait en fonction de l’évolution clinique du patient et du suivi des paramètres biologiques. Dans le même temps, les examens d’immuno-hématologie sont réalisés permet- tant d’adapter la délivrance en isogroupe. Du côté EFS, ce protocole nécessite une organisation sans faille : des valises de CGR prêtes à l’emploi sont conditionnées et conservées à 4 C, les PFC de groupe AB sont pré-conditionnés dans l’attente d’une décongélation et d’une délivrance rapide. Ces conduites systématisées simplifiées présentent l’avantage d’une rapidité d’exécution et de mise à disposition des PSL dans un souci d’épargne des ressources. http://dx.doi.org/10.1016/j.tracli.2013.03.182 07. Biothérapies et greffes (cellules hématopoïétiques, cellules souches, médecine réparatrice, immunothérapie) P173 Cryoconservation de cellules souches et progénitrices hématopoïétiques amplifiées ex vivo à partir de cellules CD34+ de sang placentaire Z. Ivanovic a , P. Duchez a,, J. Chevaleyre a , M. Vlaski a , P. Brunet de la Grange a , G. Wouters b a EFSAqli, Bordeaux, France b FAT STEM, Buggenhout, Belgique Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (P. Duchez) Notre protocole d’expansion de cellules CD34+ de sang placentaire qui per- met d’amplifier les progéniteurs engagés sans diminuer les cellules souches hématopoïétiques assurant une greffe à long et à court terme fait actuellement l’objet d’un essai clinique contexte allogénique adulte dont les résultats sont prometteurs. Ainsi, si la greffe de cellules de sang placentaire amplifiées ex vivo devient une réalité, elle se confronte au problème de la cryoconserva- tion du produit d’expansion afin d’assurer sa conservation pour le transport et une utilisation future. C’est pourquoi nous avons exploré la possibilité de maintenir les propriétés fonctionnelles des CSH et des progéniteurs engagés après congélation et décongélation des cellules amplifiées ex vivo en comparant le protocole standard de cryoconservation (albumine humaine – (HSA)/DMSO) avec un protocole inédit basé sur une solution de congélation enrichie (milieu HP01/DMSO). L’étude de l’indice de viabilité, du nombre de CD34+ et de cellules totales, et du rendement de progéniteurs engagés et de cel- lules souches hématopoiétiques (CSH) indique que la cryoconservation et la décongélation des cellules de sang placentaire HSA/DMSO réduit de fac ¸on significative les progéniteurs engagés (40 %) et les cellules souches hémato- poïétiques (diminution drastique de la capacité de greffe des souris NSG). En revanche le protocole HP01/DMSO améliore la préservation des progéni- teurs engagés (> 60 %) sans altérer la capacité de greffe des cellules souches hématopoïétiques. Ainsi, le maintien fonctionnel de la greffe amplifiée ex vivo par cryoconservation est faisable en conditions compatibles avec les exigences de thérapie cellulaire humaine. http://dx.doi.org/10.1016/j.tracli.2013.03.183 P174 Conservation des cellules souches hématopoïétiques dans le sang placentaire (SP) jusqu’à 72 h après prélèvement à +4 C Z. Ivanovic a , L. Rodriguez a , M. Plainfosse b , P. Duchez a,, J. Chevaleyre a , B. Dazey a , B. Delorme b a EFSAqli, Bordeaux, France b Macopharma, Tourcoing, France Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (P. Duchez) Nous avons conc ¸u et validé un procédé innovant de conservation à 72 h des uni- tés de sang placentaire (USP) par utilisation d’un milieu de préservation (GMP, défini, xéno free) aux propriétés nutritives et anti-oxydatives associé à une poche imperméable au gaz (Macopharma, France) Cela afin d’assurer un environne- ment de conservation optimal des cellules souches et progénitrices du SP, tout en évitant l’effet néfaste de l’hyper-oxygénation (O 2 atmosphérique = 21 %) sur ces cellules d’intérêt (O 2 sang placentaire = 1,5 à 3 %). Une étude comparative, menée sur des USP ainsi maintenues à 72 h versus des USP prélevées selon la routine actuelle à 24 h, a montré : – un maintien équivalent en nombre des cellules CD34+ et des CFU ; – le maintien de la totalité des cellules souches (Scid Repopulating Cells [SRC]) à 72 h, alors qu’elles déclinent significativement si le SP est prélevé selon la routine. Cet avantage qualitatif est maintenu après miniaturisation (Sepax ® , Biosafe, Suisse), congélation, et décongélation des USP. À l’inverse, le rendement des cellules nucléées totales (CNT) après conservation 72 h et miniaturisation est moindre de 30 %, par rapport à une USP de la routine (miniaturisé à 24 h). Cette baisse, due à une perte des granulocytes, est annulée par la congéla- tion/décongélation des USP après laquelle le nombre de CNT est alors similaire. Ce nouveau procédé de conservation des USP pendant trois jours à +4 C permet donc un maintien optimum de la capacité hématopoïétique des USP stockées, des délais plus longs pour manipuler et stocker les USP, des prélèvements dans les maternités géographiquement éloignées des banques, ainsi que l’inclusion d’USP prélevées les week-ends. http://dx.doi.org/10.1016/j.tracli.2013.03.184 P175 Stabilité fonctionnelle à +4 C des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques amplifiées ex vivo à partir de cellules CD34+ de sang placentaire

Conservation des cellules souches hématopoïétiques dans le sang placentaire (SP) jusqu’à 72h après prélèvement à +4°C

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rotocole de prise en charge transfusionnelle d’uneémorragie massive en réanimation-déchocage au CHU derenoble

. Giroux-Lathuile a, J. Brun b, M. Francois a,∗, S. Anselme-Martin a,. Albaladejo b

EFS Rhône Alpes, Grenoble, FranceCHU de Grenoble, Grenoble, FranceAuteur correspondant.dresse e-mail : [email protected] (M. Francois)

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ant d’adapter la délivrance en isogroupe.u côté EFS, ce protocole nécessite une organisation sans faille : des valisese CGR prêtes à l’emploi sont conditionnées et conservées à 4 ◦C, les PFC deroupe AB sont pré-conditionnés dans l’attente d’une décongélation et d’uneélivrance rapide.es conduites systématisées simplifiées présentent l’avantage d’une rapidité’exécution et de mise à disposition des PSL dans un souci d’épargne desessources.

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7. Biothérapies et greffes (cellules hématopoïétiques,ellules souches, médecine réparatrice, immunothérapie)

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ryoconservation de cellules souches et progénitricesématopoïétiques amplifiées ex vivo à partir de cellulesD34+ de sang placentaire

. Ivanovic a, P. Duchez a,∗, J. Chevaleyre a, M. Vlaski a,. Brunet de la Grange a, G. Wouters b

EFSAqli, Bordeaux, FranceFAT STEM, Buggenhout, BelgiqueAuteur correspondant.dresse e-mail : [email protected] (P. Duchez)

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ématopoïétiques assurant une greffe à long et à court terme fait actuellement

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’objet d’un essai clinique contexte allogénique adulte dont les résultats sontrometteurs. Ainsi, si la greffe de cellules de sang placentaire amplifiées exivo devient une réalité, elle se confronte au problème de la cryoconserva-ion du produit d’expansion afin d’assurer sa conservation pour le transportt une utilisation future. C’est pourquoi nous avons exploré la possibilité deaintenir les propriétés fonctionnelles des CSH et des progéniteurs engagés

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eurs engagés (> 60 %) sans altérer la capacité de greffe des cellules souchesématopoïétiques.insi, le maintien fonctionnel de la greffe amplifiée ex vivo par cryoconservation

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EFSAqli, Bordeaux, FranceMacopharma, Tourcoing, FranceAuteur correspondant.dresse e-mail : [email protected] (P. Duchez)

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ent de conservation optimal des cellules souches et progénitrices du SP, toutn évitant l’effet néfaste de l’hyper-oxygénation (O2 atmosphérique = 21 %) sures cellules d’intérêt (O2 sang placentaire = 1,5 à 3 %).ne étude comparative, menée sur des USP ainsi maintenues à 72 h versus desSP prélevées selon la routine actuelle à 24 h, a montré :un maintien équivalent en nombre des cellules CD34+ et des CFU ;le maintien de la totalité des cellules souches (Scid Repopulating Cells [SRC])72 h, alors qu’elles déclinent significativement si le SP est prélevé selon la

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tabilité fonctionnelle à +4 ◦C des cellules souches etrogénitrices hématopoïétiques amplifiées ex vivo à partire cellules CD34+ de sang placentaire