LA PHASE PRE-ANALYTIQUE LA PHASE PRE-ANALYTIQUE EN BIOLOGIE MEDICALEEN BIOLOGIE MEDICALE

DR.M.BEAULOYE

23 Février 2000

Le processus pré-analytiqueLe processus pré-analytique se situe entre la prescription et l’analyse échappe le plus souvent au biologiste est une prestation importante pour le généraliste en

médecine ambulatoire comporte des spécificités liées aux spécialités de la

biologie médicale est clairement défini par la loi tant en France

(GBEA) qu’en Belgique (A.R. 3/12/1999) possède une dimension économique.

La phase pré-analytiqueLa phase pré-analytique ses étapes et ses spécificités ses étapes et ses spécificités

La prescription La préparation du patient La préparation du

matériel L’acte de prélèvement La conservation et la

transmission des échantillons

La non conformité

Chimie - Hormonologie Hémostase Hématologie Bactériologie Parasitologie - mycologie Immunologie Toxicologie Biologie moléculaire

Les Responsabilités du PrescripteurLes Responsabilités du Prescripteur

Identification non ambiguë du patient : nom, prénom, sexe, date de naissance, adresse.

Nom du médecin demandeur, n° d’identification, manière de le contacter et adresse pour la réponse.

Date et éventuellement durée de la collecte. Renseignements cliniques

Les Responsabilités du PrescripteurLes Responsabilités du Prescripteur

Particularités utiles à l’exécution des analyses et à l’interprétation des résultats.

Degré d’urgence éventuel. Renseignements administratifs nécessaires

imposés par la loi sur l’AMI. Ces données doivent être communiquées sur

la prescrition électronique ou papier du laboratoire.

La Phase Pré-AnalytiqueLa Phase Pré-Analytiqueen Biochimieen Biochimie

Quels tubes choisir? sérum ou plasma? Les modalités du prélèvement La situation physiologique du patient Etiquetage Délai et Conditions de transport

Sérum ou Plasma ?Sérum ou Plasma ?

En règle générale, le sérum est préféré au plasma •Tube sec avec gel séparateur en évitant u n phénomène résiduel de coagulation et l’hémolyse.•Tube hépariné - héparinate de lithium - moins utilisé du fait de la propriété inhibitrice de l’héparine sur la réaction antigène-anticorps.•Dans certains cas, nécessité de substances additives et/ou d’autres anticoagulants.

Procédures spéciales de prélèvementProcédures spéciales de prélèvement

Glucose plasma fluoré

Acide lactique plasma fluoré, pas de garrot

Alcool plasma fluoré

ACTH plasma EDTA, glace fondante

PTH plasma EDTA, glace fondante

Thyrocalcitonine plasma EDTA, glace fondante

Glucagon EDTA + aprotinine + glace

Les procédures spéciales de prélèvementLes procédures spéciales de prélèvement

Catécholamines héparine + glutathion + glace

Sérotonine héparine + glace

VIP - PP EDTA + zymofren +glace

Somatomédine C EDTA + glace

Somatotrophine STH EDTA + glace

E. de conversion ACE sérum + glace

Gastrine sérum + glace

LES URINESLES URINES

Difficulté de la collecte rigoureuse de toutes les mictions des 24 heures.

Dosage associé de la créatininurie Stockage à +4C° des urines pendant la

durée du receuil Addition d’antiseptiques améliore la

conservation Acidification (pH<2) indispensable pour le

dosage des catécholamines

Les modalités du prélèvementLes modalités du prélèvement

Pose du garrot : pas d’influence si < 1 min. Remplissage correct des tubes en respectant le

rapport des volumes sang/anticoagulant Ordre de remplissage des tubes : secs (sérum),

citratés (coagulation-vs), (hépariné), EDTA (hémato), fluoré (glycémie)

Règles d’hygiène et de sécurité pour le patient,pour le préleveur et pour le personnel du laboratoire.

Influence de la stase veineuseInfluence de la stase veineuse«Effet garrot»«Effet garrot»

Les protéines et les molécules qui leur sont liées ne diffusent pas à travers la paroi vasculaire alors que les autres constituants migrent hors du secteur plasmatique.

Augmentation de la concentration de 20% en moyenne pour les protéines, les lipides, les enzymes, la bilirubine et le fer sérique et de 8% pour le calcium.

La contraction musculaire pendant la pose du garrot élève [ K et Acide lactique]

Situation physiologique du patientSituation physiologique du patient

Jeûne strict de 8 à 12h : glucose, lipides et hormones.

Jeûne «lipidique». Régimes Stress, position couchée ou debout Rythme circadien Cycle menstruel - Grossesse - Allaitement Exercice physique Tabagisme chronique Traitement

Rythme circadien Rythme circadien

Analyte [ ] max. [ ] min.

ACTH matin 6-10 nuit 0-4

Catécholamines matin 9-12 nuit 2-5

Aldostérone nuit 2-4 PM 12-14

Cortisol matin 5-8 nuit 21-3

Phosphate nuit 2-4 matin 8-12

Fer PM 14-18 nuit 2-4

Rythme circadienRythme circadien

Analyte [ ] max. [ ] min.

Prolactine matin 5-7 matinée 10-12

Rénine nuit 0-6 matinée 10-12

STH ou hGH soir 21-23 nuit/jour 1-21

Testostérone nuit 2-4 nuit 20-24

TSH soir/nuit 20-2 matin 7-13

Délai et conditions de transportDélai et conditions de transport

Le sang total, sauf cas particuliers, se conserve 6 à 8 heures entre 15 et 22°.

Il appartient au préleveur de se soucier des conditions de stabilité des constituants à doser (congélation, conservateurs, obscurité).

Le contact prolongé du plasma ou du sérum avec les éléments figurés du sang altère la concentration des analytes : K, P, LDH, glucose, acide pyruvique, acide lactique, NH3, hormones.

Autres causes d’erreursAutres causes d’erreurs

Hémolyse : passage dans le sérum ou le plasma des constituants présents en forte concentration dans les hématies : K, P, LDH, TGO et interférence de Hb dans certains dosages. Peut être visible ou non mais présente; intravasculaire ou provoquée par le prélèvement.

Photosensibilité : bilirubine, porphyrines, vitamines Hyperlipémie : perturbation de nombreux dosages -

impossibilité de réalisation

La Phase Pré-Analytique en La Phase Pré-Analytique en HémostaseHémostase

Importance du processus pré-analytique sur la qualité des examens en hémostase.

Conditions de prélèvement Nature et concentration de l’anticoagulant Conservation du prélèvement Exposé limité aux AVK qui allongent le temps de

Quick en abaissant les taux des facteurs II,VII,IX et X ainsi que PC et PS

Temps de QuickTemps de QuickConditions optimales Conditions optimales

Tube sous vide de 4.5 ml ou 1.8 ml Citrate trisodique à 3.8% Remplissage 100% Hématocrite entre 30 et 55% Taille de l’aiguille 0.7 à 1 mm Prélèvement aisé Durée de maintien du garrot < à 1min

Temps de QuickTemps de QuickConditions optimalesConditions optimales

Place du tube : 2ème tube, après tube sec et avant tube EDTA ou hépariné

Température de transport : ambiante Délai avant le test : 4h Interférences médicamenteuses : signaler les médicaments

potentialisateurs et inhibiteurs Interférences alimentaires : produits de régime, légumes à

feuilles vertes (chou frisé, chou râve, épinards, laitue, chou vert) contenant vit.K

Prélèvements non conformesPrélèvements non conformes

Ponction difficile et/ou début de coagulation

Contamination par héparine (tube, cathéter ou aiguille)

Tube inadéquat (EDTA ou fluorure)

Remplissage du tube inférieur à 90%

Délai de traitement supérieur à 4h

Prélèvement hémolysé (raccourcissement du TCA)

Prélèvement lactescent interférant avec le dosage

T° de transport non respectée

Médicaments potentialisateurs des AVKMédicaments potentialisateurs des AVK

Anti-inflammatoires non stéroïdiens : aspirine, phénylbutazone Antibiotiques : pénicillines y compris céphalosporines,

chloramphénicol, néomycine, sulfamides Antifungiques : métronidazole,kétoconazole,miconazole Antidépresseurs tricycliques, chlorpromazine Antidiabétiques : tolbutamide, chlorpropamide Hypocholestérolémiants : fibrates Hormones : stéroïdes anabolisants, hormones thyroïdiennes,

tamoxifène Hypo-uricémiants : allopurinol Divers : amiodarone

Les médicaments inhibiteurs des AVKLes médicaments inhibiteurs des AVK

Antibiotiques : rifampicine Antifungiques : griséofulvine Antiépileptiques, phénytoïne, barbituriques, méprobamate,

chlordiazépoxide Antidiabétiques : metformine Hypocholestérolémiants : colestyramine Hormones: corticoïdes, estrogènes, contraceptifs oraux

Merci de votre attention !

Bonne Nuit !