Rapport d’activité 2010

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Laboratoire de pathologie équine de Dozulé

Le laboratoire de pathologie équine de l’Anses réunit 29 personnes au sein de trois unités de recherche - « bactériologie et parasitologie », « épidémiologie et anatomie pathologique » ainsi que « virologie ».

Ses activités se concentrent sur la maîtrise des risques sanitaires liés aux maladies infectieuses et parasitaires des chevaux selon deux grandes orientations : l’épidémiologie et l’épidémiosurveillance de ces maladies ainsi que l’amélioration de leurs moyens de diagnostic et de contrôle.

Le laboratoireen quelques motsIl est laboratoire national de référence (LNR) et laboratoire de référence de l’Union européenne (LR-UE) pour la métrite contagieuse équine, la dourine, l’artérite virale équine, les herpèsviroses équines et l’anémie infectieuse des équidés.

Ses principaux programmes de recherche portent sur :

• l’épidémiologie et la caractérisation moléculaire des agents pathogènes responsables de ces maladies ;

• le développement ou l’optimisation d’outils de diagnostic sérologique ou moléculaire pour ces mêmes pathologies ;

• l’épidémiologie, le pouvoir pathogène et la caractérisation de Rhodococcus equi ainsi que le développement de moyens de contrôle de la maladie ;

• l’étude de l’antibiorésistance et de la virulence des principales bactéries pathogènes du cheval en partenariat avec le laboratoire Anses de Lyon ;

• l’épidémiologie et les caractéristiques lésionnelles des principales maladies équines d’élevage.

Les grandes évolutionsinternes ou externesAu cours de l’année 2010, le laboratoire a diversifié et renforcé ses collaborations avec d’autres équipes scientifiques, aussi bien sur le plan national que sur le plan international.

On peut citer en particulier des collaborations de recherche :

• sur l’anémie infectieuse avec l’unité mixte de recherche 754 et avec les laboratoires de référence nationaux allemand, belge et roumain ;

• sur la métrite contagieuse avec le laboratoire de biologie moléculaire de l’université d’Azabu au Japon ;

• sur les peptides antimicrobiens avec l’université de Kiel (Allemagne) et l’université de l’Ohio (États-Unis).

Le partenariat avec le laboratoire de Lyon s’est poursuivi avec l’engagement du projet sur la virulence et l’antibiorésistance des souches de R. equi (projet ReVA).

Par ailleurs, une convention a été passée avec l’École nationale vétérinaire d’Alfort pour organiser l’accueil en stage d’étudiants vétérinaires de 5e année (spécialisation en médecine équine) au sein de l’unité épidémiologie et anatomie pathologique.

Chiffres clés

35 stagiaires accueillis en formation

1 étudiante en thèse d’université et 2 étudiants vétérinaires en thèse

8 conventions de recherche et 2 conventions-cadre

14 publications dont 8 dans des revues internationales à comité de lecture

Chronologie

> 29 avril : réunion de travail des trois piliers de la recherche équine régionale pour définir des axes stratégiques de recherche communs :

- le Cirale-Enva (Centre d’imagerie et de recherche sur les affections locomotrices équines de l’École nationale vétérinaire d’Alfort) ;

- le laboratoire Frank Duncombe, ; - le laboratoire de pathologie équine de l’Anses

> 16 juin  : démarrage du premier EILA européen pour le diagnostic sérologique de l’anémie infectieuse

> 7 juillet : création de l’Association de préfiguration de la fondation de coopération scientifique Hippicum

> 20 septembre : colloque scientifique sur l’anatomie pathologique équine, inauguration du nouveau bâtiment d’autopsie mis à la disposition du laboratoire par le conseil régional de Basse-Normandie et colloque sur l’anatomie pathologique

> 20 octobre : workshop du LR-UE sur l’anémie infectieuse des équidés

> 24 novembre : convention-cadre avec l’université de Caen - Basse-Normandie

Les améliorations apportées permettent un meilleur respect des normes d’hygiène et de sécurité, ainsi que des règles associées à la démarche qualité.

Plus ergonomiques et fonctionnels, les nouveaux locaux prennent en compte les activités de formation et notamment l’accueil régulier de stagiaires vétérinaires. Le bâtiment a été mis en fonctionnement le 1er juillet.

Achèvement du projet de recherche pour développer un vecteur d’antigènes vaccinaux contre la rhodococcoseIl a donné lieu à un partenariat avec :

• l’unité Écologie et physiologie du système digestif de l’Institut national de la recherche agronomique (Inra) ;

• l’équipe 2128 du centre hospitalier universitaire de Caen.

Ce projet a permis d’obtenir et de valider les souches vaccinales de Lactococcus lactis productrices de l’antigène VapA de R. equi, présenté à la surface membranaire ou sécrété, ainsi que la souche de L. lactis productrice de la leptine. Cette protéine posséderait un rôle immunostimulant en polarisant la réponse immunitaire vers la voie Th1. Les résultats obtenus chez la souris ont démontré l’efficacité de ce modèle vaccinal dans l’élimination du pathogène R. equi suite à un challenge infectieux. Il est administré soit par voie orale, seul ou en association avec la leptine, soit par voie nasale en association avec la leptine. Il s’agit de la première étude portant sur une stratégie d’immunisation efficace associée à une parfaite innocuité contre R. equi.

Les grands chantiers engagésPrise en compte des risques psychosociaux dans l’animation du laboratoireÀ la suite des résultats des enquêtes locales de la médecine du travail et de l’Anses au plan national, différentes actions ont été mises en place. Elles sont destinées à améliorer la communication, ainsi que le sentiment d’appartenance au laboratoire et à l’Anses :

• information systématique du personnel sur les visites du laboratoire et les réunions ;

• organisation de réunions mensuelles d’information sur les activités et les résultats obtenus dans les unités et services ;

• organisation deux fois par an d’une assemblée de laboratoire suivie d’un déjeuner convivial ;

• accès de tout le personnel aux comptes-rendus des différentes réunions.

Les projets initiés par les collectivités territoriales pour renforcer l’attractivité de la Basse-Normandie pour les professionnels du cheval se mettent progressivement en place. L’ambition est d’améliorer la visibilité de la recherche équine locale en fédérant les équipes autour de thématiques communes et en leur fournissant des installations et équipements de pointe. La concrétisation de cette ambition comprend deux volets :

• la construction d’une plateforme technique d’innovation ;

• la création d’une fondation de coopération scientifique (Hippicum) qui assurera la gestion de la plateforme, l’animation des équipes scientifiques et le pilotage de la recherche.

Activité 2010

Les travauxLe laboratoire a poursuivi ses activités de LNR et de LR-UE. Ces études visaient principalement au génotypage des agents infectieux et à l’amélioration des méthodes de diagnostic. Dans le cadre de l’observatoire anatomo-pathologique, 349 autopsies d’équidés ont été réalisées. Elles ont conduit à la réalisation d’examens complémentaires en bactériologie, mycologie et parasitologie. L’exploitation de la banque de données d’autopsie a permis la réalisation d’une étude rétrospective sur les causes de morts subites chez le cheval.

Par ailleurs, divers projets de recherche sans lien avec les mandats de référence ont été menés :

• deux projets transversaux avec le laboratoire de Lyon concernant, l’un, le portage nasal de staphylocoques pathogènes chez les chevaux d’élevage et, l’autre, sur l’antibiorésistance et la virulence des souches de R. equi rencontrées en Basse-Normandie ;

• l’exploration des mécanismes moléculaires impliqués dans les étapes précoces de l’infection par R. equi ;

• une étude de la relation entre la concentration en aérosol de R. equi et la prévalence de la maladie dans les élevages.

Les grands chantiers menés à termeMise en service du nouveau bâtiment d’autopsiePrenant en considération les attentes des professionnels, les besoins de recherche et d’expertise scientifique de l’Anses ainsi que la vétusté des locaux, la région a initié dès 2006 le projet de construction d’un nouveau bâtiment.

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Exploration d’une crise sanitaire due à Salmonella Typhimurium multirésistante aux antibiotiques en filière équine

Suite à l’identification par le réseau de surveillance des salmonelles d’origine non humaine (Laboratoire de sécurité sanitaire des aliments de Maisons-Alfort) d’une contamination par Salmonella Typhimurium multirésistante aux antibiotiques (ST-MDR) en filière équine, une investigation a été conduite, entre mai et juillet 2010, pour rechercher la source de contamination. Le laboratoire de pathologie équine de Dozulé a été chargé de cette investigation, en collaboration avec le laboratoire de sécurité des aliments de Maisons-Alfort, et avec l’appui méthodologique et technique des laboratoires de Lyon et de Ploufragan-Plouzané. Cette investigation a ciblé 7 élevages et 1 clinique vétérinaire dans lesquels des chevaux infectés avaient séjourné. Plus de 250 prélèvements ont été réalisés à partir de l’environnement et de crottins. Trois hypothèses ont pu être émises quant à l’origine de la contamination. Par ailleurs, un appui technique et scientifique a été apporté à la clinique vétérinaire concernée avec la mise en place de procédures de désinfection/vide sanitaire et des prélèvements séquentiels réalisés dans l’environnement afin de prévenir les risques de dissémination des salmonelles multirésistantes. Un dernier contrôle des locaux de la clinique a été réalisé en février 2011 (résultats négatifs).

Agence nationale de sécurité sanitaire de l’alimentation, de l’environnement et du travailLaboratoire de pathologie équine de DozuléGoustranville 14430 Dozuléwww.anses.fr

Principales publicationsArticles scientifiquesBreuil M.-F., Duquesne F., Laugier C. & Petry S. (2010) Indirect immunofluorescence test using polyclonal antibodies for detection of Taylorella equigenitalis. Res. Vet. Sci. 88(3): 369-71. Epub 2009 Dec 3.

Hébert L., Cauchard J., Doligez P., Quitard L., Laugier C. & Petry S. (2010) Viability of Rhodococcus equi and Parascaris equorum eggs exposed to high temperatures. Curr. Microbiol. 60 (1): 38-41. Epub 2009 Sep 1.

Duquesne F., Hébert L. (co-premiers auteurs), Sévin C., Breuil M.-F., Tapprest J., Laugier C. & Petry S. (2010) Plasmid diversity analysis of 96 Rhodococcus equi strains isolated in Lower Normandy and sequencing of the 87-kb type I virulence plasmid. FEMS Microbiol. Letters, 311(1): 76-81. Epub 2010 Aug 12.

Hébert L., Petry S. & Laugier C. (status: final production) Pathogen inactivation during horse manure composting, in Horses: Biology, Domestication, and Human Interactions, Ed. Nova Science Publishers (James E. Leffhalm), ISBN : 978-1-61761-428-6.

Haenni M., Targant H., Forest K., Sévin C., Tapprest J., Laugier C., Madec JY. (2010) Retrospective study of necropsy-associated coagulase-positive staphylococci in horses. J Vet Diagn Invest, Nov;22(6):953-956.

Pronost S., Pitel PH., Miszczak F., Legrand L., Marcillaud-Pitel C., Hamon M., Tapprest J., Balasuriya UB., Freymuth F., Fortier G. (2010) Description of the first recorded major occurrence of equine viral arteritis in France. Equine Vet J, Nov;42(8):713-20.

Hans A., Morilland E., Lecouturier F., Laugier C., Zientara Z., Chemel A., Coulibaly E., Ponçon N. Anémie infectieuse des équidés : bilan de l’épisode varois de 2009. Bulletin epidémiologique, septembre, 39 : 10-13.

Granier S., Maillard K., Tapprest J. (2010) Détection d’une contamination par Salmonella de sérotype Typhimurium multirésistante dans les filières bovine et équine en Normandie. Bulletin épidémiologique de l’Afssa, juin, 37 :15.

Danan S., Granier S., Gay E., Salvat G., Tapprest J. (2010) Investigation d’un épisode de contamination par Salmonella Typhimurium multirésistante aux antibiotiques.

RapportsRapports d’expertise : saisine 2010-SA-0097 et saisine 2010-S1-0141.