LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :Recherche de la voie d’attaque du glucose

Les bactéries peuvent attaquer le glucose par :

- VOIE OXYDATIVE : le glucose est utilisé uniquement en présence de dioxygène (faible libération d’acides)

- VOIE FERMENTATIVE : le glucose est utilisé :

- en absence et en présence de dioxygène (forte libération d’acides)

- ou seulement en absence de dioxygène (forte libération d’acides)

1. Intérêt

2. Composition

Ce milieu contient (entre autre) :

-une base nutritive avec peu de peptones : apport de facteurs de croissance, de source de carbone d’azote, …

- le bleu de bromothymol : indicateur de pH

- du glucose stérile à 1% (à ajouter juste avant l’ensemencement)

3. Principe (cf. fiche technique)

LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :Recherche de la voie d’attaque du glucose

4. Technique d’ensemencement

Régénerer le tube 20 min à 100 °C

Incuber à l’étuve 24h à 37 °C

Ajouter stérilement le glucose pour une

Cfinale = 1 % puis refroidir sous

l’eau froideEnsemencer avec une

piqûre centrale à l’aide du fil droit

LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :Recherche de la voie d’attaque du glucose

5. Lecture (après avoir vérifié la présence de culture dans le tube)

OBSERVATION

INTERPRETATION

CONCLUSION

Acidification révélée par le virage de l’indicateur de pH uniquement en présence de dioxygène :

ATTAQUE DU GLUCOSE UNIQUEMENT EN PRESENCE

DE DIOXYGENE

Acidification révélée par le virage de l’indicateur de pH uniquement en absence de dioxygène :

ATTAQUE DU GLUCOSE UNIQUEMENT EN ABSENCE

DE DIOXYGENE

LES BACTERIES DEGRADENT LE GLUCOSE PAR VOIE

OXYDATIVE

LES BACTERIES DEGRADENT LE GLUCOSE PAR VOIE

FERMENTATIVE

LE MILIEU HUGH ET LEIFSON :Recherche de la voie d’attaque du glucose

5. Lecture (après avoir vérifié la présence de culture dans le tube)

OBSERVATION

INTERPRETATION

CONCLUSION

Acidification révélée par le virage de l’indicateur de pH en présence et en absence de dioxygène :

ATTAQUE DU GLUCOSE EN ABSENCE (ET

EVENTUELLEMENT EN PRESENCE) DE DIOXYGENE

LES BACTERIES DEGRADENT LE GLUCOSE PAR VOIE

FERMENTATIVE

(VOIE OXYDATIVE NON EXCLUE)

Alcalinisation révélée par le virage de l’indicateur de pH en présence de dioxygène :

PAS D’ATTAQUE DU GLUCOSE MAIS UTILISATION

DES PEPTONES COMME SOURCE D’ENERGIE ET DE

CARBONE

BACTERIES INERTES

VIS-A-VIS DU GLUCOSE