LES MILIEUX D’ISOLEMENT DES COQUES GRAM +

Peptone trypsique de caséine 15 g

Peptone papaïnique de soja 5 g

Chlorure de sodium 5 g

Agar (gélose) 15 g ED qsp

1 L

Composition

Source de C et N

Source minérale

pH = 7,2

La gélose trypticase soja

Milieu d’isolement riche qui convient à tous les microorganismes exigeants

Mélange de peptones 23 g

Amidon 1 g

Chlorure de sodium 5 g

Agar (gélose) 15 g ED qsp

1 L

Composition

Source de C et N

Source minérale

pH = 7,1

La gélose COLUMBIA

Milieu d’isolement , servant de base pour la préparation des géloses au sang.Gélose riche qui peut être additionnée de nombreux suppléments, et la rendre sélective à certains groupes bactériens.

Source glucidique de C

Base trypticase soja, ColumbiaPeptones riches en acides aminés et vitaminesAmidonNaClagar

Composition

La gélose au sang frais

A ce milieu de base, il faut ajouter 5% de sang frais de mouton ou de cheval défibriné et stérileMilieu d’isolement riche qui convient à tous les microorganismes exigeants ou non. Il permet aussi une orientation en fonction du caractère hémolytique pour les streptocoques

Préparation du milieu

Déposer le volume de sang nécessaire en faisant des gouttes séparées dans le fond de la boîte de pétri.

Pipette Pasteur stérile

Couler par-dessus les gouttes de sang la gélose en surfusion à 45°C Homogénéiser en faisant des petits cercles concentriques.

Peptone 20 gExtrait de levure 5 gBile de boeuf 10 g Chlorure de sodium 5 gCitrate de sodium 1 gEsculine 1 gCitrate de fer ammoniacal 0,5 gAzide de sodium 0,25 gAgar (gélose) 13,5 g ED qsp 1 L

Composition Source de C et N

Inhibiteur de croissance

Ind des produits d’hydrolyse de l’esculine

pH = 7,1

Source de C, N, vitamines et minéraux

La gélose BEA (bile – esculine – azide de sodium)

Source glucidique

Inhibiteur de croissance

Milieu d’isolement simple, sélectif et d’orientation

L’azide de sodium empêche la croissance des bactéries Gram – et de tous les streptocoques sauf ceux du groupe D.La bile inhibe les bactéries Gram + sauf les streptocoques du groupe D. L’azide de sodium et la bile sélectionnent la culture des entérocoques et des streptocoques du groupe D.

Lecture

Petites colonies translucides entourées d’un halo noir:ESCULINE +Orientation vers les Streotococcus D dont fait partie le genre Enterococcus.

Colonies d’ascpect variable, sans noircissment du milieu:ESCULINE –Orientation vers d’autres germes différents des Streptococcus D

Halo clair (éclaircissement autour des colonies)Hémolyse totale des globules rouges : HEMOLYSE

Lecture

Halo verdâtre autour des coloniesHémolyse partielle des globules rouges : HEMOLYSE Milieu inchangé autour des

coloniesAbsence d’hémolyse.