CAHIER SPECIAL] IV~me Ioum~e Scientifique du Laboratoire Marcel M~fieux

L'impor ance du pr -analgtique en biochimie

Dr A. BOUTRON Labora[oire de Biochimie, [flu de Bic~Lre

De nornbreux param~tres interviennent dans la phase pr~analytique. Darts le cadre de la preparation du patient, les facteurs environnementaux, physiologiques et th~rapeutiques peuvent interf~rer avec le r~sultat d'une analyse et, dans ce cadre, la ~iche m~dicale de suivi, recommand~e par le GBEA, semble imperative.

D'autres param~tres, moins li~s au patient, sont ~galement importants ~ consid~rer : ce sont le recueil de l'~chan-

tillon, son acheminement et sa conservation, puis sa r~ception au laboratoire et s o n traitement.

I. PRINCIPAUX FACTEURS DE VARIATION BIOLOGIQUES :

A PRENDRE EN COMPTE DANS LES VALEURS USUELLES

L'~ge est le premier de ces ~acteurs (diapositive 6). II est padiculi~- rement important pour certains pa~am~tres comme les phosphatases alcalines (valeurs usuelles io lois plus ~lev~es chez l'enfant que chez radulte), la bil irubine (ict~re physiologique du nouveau-n~) ou le cholesterol (augmentation moyenne de o,~,o mmolll tous les dix ans chez radulte entre 20 et 60 ans). Le sexe intervient ~galement (variations li~es ~ la masse musculaire ou ~ l ' impr~gnation hormonale ; valeurs "usuelles" g~n~ralement plus ~lev~es chez rhomme, saul pour le HDL-cholest~rol) ainsi que la grossesse et la m~nopause ou encore le poids, la ta111e ou l'~tat de je~ne (il importe de pr~ciser le hombre d'heures de jeBne n~cessaires avant certains dosages).(diapositive 7) Les autres ~acteurs ~ prendre en compte sont li~s ~ ralimentation : carotene, caf~ine (hyperglyc~mJante), r~glisse (hyperkali~miante), alcool ; ils sont aussi li~s ~ renvironnement (stress, tabac) ou aux rythmes biologiques (rythmes saisonniers et variations nycth~m~rales).

Enfin, les prises m~dicamenteuses doivent ~tre connues en raison de possibles interferences analytiques in vitro ou d'interf~rences in vivo, par ph~nom~ne d' induct ion enzymatique (ph~nytoine et gamma GT), d' inhibit ion enzymatique (allopufinol et acide urique) ou de cytotoxicit~ (biguanides et lactates).

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MDt-gholcst~ol

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• Age

• Sexe

• Grossesse

• M ~ n o p a u s e

• Poids et Ta i l le

II. PRINCIPAUX FACTEURS DE VARIATIONS LIES AU PRELEVEMENT

La position du patient (deboutlcouch~) au moment du pr~l~vement

et le temps de pose du garrot peuvent modifier les r~sultats de cedains dosages, par exemple, un garrot laiss~ trop longtemps provoque

une h~moconcentration. Ainsi, le temps de pose pr~conis~ est de moins de ~ minute. Le recueil de r~chantillon doit tenir compte de la nature du r~cipient, de la nature de raddit i f , de l'ordre de pr~l~vement des tubes ainsi que de leur remplissage. En biochimie, se pose souvent la question de havailler sur s~rum ou plasma : le plasma permet une centfifugation rapide, ce qui est un avantage en urgence, et est moins sujet aux interferences. Toutefois aujourd'hui, le s~rum peut aussi ~tre obtenu rapidement, grace ~, certains tubes contenant des acc~l~rateurs de coagulation.

Concemant l'ordre des tubes, il convient de pr~lever d'abord les flacons st~riles (h~mocultures) puis les tubes secs, les tubes ~ h~mostase et les autres. Enfin, rhomog~n~isation des ~chantillons doit ~tre co~'recte. Toutes ces r~gles devraient ~tre not~es dans des tables de pr~coni- sation foumies par chaque laboratoire ~ ses pr~leveurs.

EXEMPLE : FICHE PRE-ANALYTIQUE POUR LES GAZ DU SANG

• Facteurs de variation li~s au pr~lEvement : - le patient doit ~tre dans on ~tat cardioventilatoire stable

depuis au moins 30 minutes - le pr~l~vement doit ~tre effectu~ en ana~robiose stride et sans garrot - le r~cipient de pr~l~vement (seringue ou tube capillaire) dolt ~tre ~tanche ~ Fair et h~parin~.

• Variations physiologiques et environnementales : Sexe (surtout pour l'h~moglobin~mie), ~ge, altitude, repas, exercice, tabac • Variations induites par les m~dicaments : Bronchodilatateurs, diur~tiques, barbitufiques, oxyg~noth~rapie, NO...

• Variations li~es ~ la nature de la ventilation : spontan~e ou assistee

• L'homog~n~isation du pr~l~vement doit ~tre correcte pour ~viter les micm-caillots et rh~molyse. La mesure des gaz du sang doit

~tre extemporan~e. Les conditions minimales ~ respecter sont un d~lai inf~rieur ~ 15 min ~ 20-25 °C pour les param~tres oxym~- tfiques, un d~lai inf~rieur ~ 30 min ~ 20-25 °C pour les mesures du pH, de la PC02 et des HC03-, ou un d~lai inf~rieur ~ 2 h ~ +4°C si l'~tanch~it~ du r~cipient est v~rifi~e.

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BIOTRIBUNE m{]J 200LI n°lO XI Laboratolre

IM~riECi~

CAHIER SPECIAL I IV ~me lourn~e Scientifique du Laboratoire Marcel M~fieux

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Extrait de:Samples: "From the patient to the laboratory", WG GUDER, B. ZANTA, O.H. WlSSER, D.S. NARA YANAN, ~996 GIT VERLAG G/VlBH

III. STABILITE DES PARAMETRES A DOSER DANS LE SANG TOTAL

(diapositive 8)

La stabilit~ doit ~tre envisag~e ~ 2o°C car, ~. 4°C, tes r~actions enzymatiques sont inhib~es, ce qui peut conduire ~ la liberation de constituants cellulaires (cas du potassium par exemple, avec I'inhibition des pompes ATPases, pH d~pendantes, permettant de maintenir le gradient de concentration plasma/cellule). Si I'analyse ne peut ~tre e~]~ectu~e rapidement, il convient de centri~uger rapidement le pr~l~vement car le s~rum et le plasma d~cant~s sont beaucoup plus stables, surtout ~ 4°C. Enfin, d'autres additi]~s peuvent ~tre ajout~s pour accroit~e la stabilit~ des analytes, en particulier les antiprot~olytiques, d~prot~inisants ou antiglycolytiques (conser- vation d'un pr~l~vement sur sang total pendant 24 heures pour dosage de la glyc~mie).

IV. RECEPTION DU PRELEVEMENT AU LABORATOIRE

Cette phase permet de v~ri~ier Ja con~ormit~ du p~l~vement. Puis vient l'~tape de centrilugation ~ l'issue de laquelle il convient d'observer

l'aspect du plasma (ou du s~rum) : un trouble, un ict~re ou une h~molyse peuvent perturber les r~sultats. Ceci est particuli~rement vrai pour l'h~molyse qui provoque une liberation d'h~moglobine (coloration rouge) et d'autres el~ments dont la concentration est potentiellement dil~rente dans le plasma et les globules. En r~gle g~n~rale, un tel pr~l~vement doit ~tre re]~us~ en raison du risque de r~sultat erron~. Enfin, si un aliquotage est n~cessaire, l'~tiquetage du tube doit ~tre correct.

V. CONCLUSION

Au total, ces quelques items (non exhaustifs) soulignent l'importance de la phase pr~-analytique sur la qualit~ de r~chantillon. Au-del~ des ]~acteurs incontournables li~s ~ la variabilit~ biologique, certains facteurs sont maTtrisables et ont pu donner lieu ~ la r~daction de )fiches pr~-analytiques analyse par analyse. •

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