Les milieux de culture

MILIEU MANNITOL MOBILITE NITRATE

Ce milieu permet l’étude de la dégradation du mannitol qui est un produit de dégradation du mannose.

Composition

pectone trypsique de viande 20 g mannitol 2 g KNO3 1 rouge de phénol 1% 4 ml agar 4 g

Rouge de phénol (indicateur de pH)

Principe

Le mannitol est un produit de réduction du mannose. La dégradation en anaérobiose du mannitol conduit à la formation de fructose dont l’attaque conduit elle-même à la

formation d’acides à chaînes courtes. mannitol fructose acides à chaînes courtes rouge de phénol jaune orangé pH = 7.6 pH < 5

* Les bactéries très mobiles peuvent se déplacer dans la gélose molle : étude de la mobilité. * Les nitrates du milieu peuvent être réduits en nitrites puis en N2 : test nitrate réductase.

Technique

Ensemencer par piqûre centrale à l’aide d’un fil droit. Incuber 24 h à T° optimale.

R : ce milieu est utilisable uniquement pour les bactéries fermentatives.

Pierre-Yves Guillaume Professeur de biotechnologie génie biologique

Les milieux de culture

Lecture

La mobilité Utilisation du mannitol

Culture dans tous le milieu souche mobile

Culture le long de la piqûre souche immobile

Milieu devenu jaune mannitol +

Milieu rouge mannitol -

• Réduction des nitrates : Voir fiche • REMARQUE :

Les nitrates inhibent l'hydrogène Iyase, enzyme catalysant la production de CO 2 et H 2l à partir du méthanoïque (HCOOH)

Dans le cas da bactéries mannitol +, le seul gaz produit est donc le CO 2. Pour celles qui sont mannitol - , l'utilisation des peptones ne produit pas de gaz : le CO 2 est alors sous forme d'hydrogénocarbonate, le milieu restant alcalin L'apparition de bulles pour une bactérie mannitol- ne peut donc être due qu'à la respiration des nitrates le gaz est alors de l'azote (N 2) .

Une bactérie aérobie stricte pourra, si elle possède une nitrate réductase, se développer dans tout la masse du milieu

Pierre-Yves Guillaume Professeur de biotechnologie génie biologique