Mostafa Kriat 2003-2004Automatisation en hématologie

Automate ADVIA 70 (Bayer)

Automatisation de l’hémogramme

Mostafa Kriat 2003-2004Automatisation en hématologie

Automate ADVIA 70 (Bayer)

22 Paramètres

WBC, RBC, HB, HCT, MCV, MCH, MCHC, RDW

NEUT, LYMPH, MONO, EOS, BASO

PLT, MPV, PCT, PDW

Parameters Precision (CV) Linearity Range

WBC 2.0% 0.1 – 99.9 x 103/µL

RBC 1.2% 0.02 – 9.99 x 106/µL

HB 1.0% 1.5 – 22.5 g/dL

MCV 1.0% 30 – 150 fL

PLT 3.0%10.0%

100 – 1,999 x103/µL10 – 99 x 103/µL

Volume échantillon : 180L

Durée cycle : 52 sec

Nombre d’échantillon/heure : 70

Technologie : variation d’impédance et détection optique

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Les avantages/inconvénients

Confort du technicien (500 à 1000 hémogrammes/jour dans certains labo)

Rapidité d’exécution et accélération du rythme des réponses aux cliniciens

Meilleure précision et meilleure reproductibilité

Coût des appareils et de l’entretien

Coût humain ?

Calibration et contôles réguliers et rigoureux

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Principes utilisés

La détection volumétrique

La détection optique

Combinaison des deux

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Inventé par Wallace Coulter en 1948

Détection volumétrique

Numération / discrimination par seuil/ correction /construction d’histogrammes

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WBC,LY,MO,GR

RBC,HGB,HCT,MCV,MCH,MCHC,RDC

PLT,PCT,MPV,PDW

24-260 fL

35-360 fL

2-20 fL

Altération des de la morphologie des GB

Détection volumétrique : résultats

2- Numération des GB après lyse des GR

4- Calculs : hématocrite, CCMH, TCMH

1- Numération des GR/plaquettes et discrimination par seuil volumétrique

3- Dosage de l’hémoglobine par méthode colorimétrique

5- Alarmes : agrégats plaquettaires, érythroblastes…

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Détection optique

Grand angle (8-20°)Diffusion (réfraction)

Petit angle (1-6°) Diffraction

TAILLE

Contenu cellulaire

Particule doit être sphérique

Détecteur

Source

Diluant

Echantillon

Lentille

Filtre

La diffraction et la diffusion :

comptage des particules

taille et contenu cellulaires

L’interruption du faisceau :

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Détection optique

Trois paramètres mesurés

Contenu

Nombre

Taille

Diagramme à 3 dimensions

nombre, taille, contenu

Projection

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Analyse des Globules rouges

Répartition GR =f(V) : normocytose, microcytose ou macrocytose

Répartition GR =f(Hb) : hypochrome ou hyperdense

Nuage de répartition taille =f(Hb)

Calcul de TGMH et CCMH

CV-GR : degré d’anisocytose

Contenu cellulaire analysé l’hémoglobine

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Analyse des Globules blancs

enzymes contenus dans les granulations primaires azurophiles des polynucléaires et de leurs précurseurs

Contenu cellulaire analysé : les myélopyroxydases

Sang (12 l)

Lyse des GR

Réaction peroxydasiqueChromogène + substrat

Lymphocytes : Monocytes :Neutrophiles :Eosinophiles :

-+

+++++++

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Analyse des Globules blancs

PEROX

Nombre

Taille

N

E

Mo

LUC

débris

L

LUC (large unstained cells) Lymphocytes hyperactivés, blastes, plasmocytes, prolymphocytes

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Analyse des noyaux

Canal baso-lobularitéSang (12 l)

Lyse des GR, plaquettes, leucocytesSauf les BASO

AnalysesDensité chromatinienne

Degré de segmentation

Baso

Polylobés

Monolobés

Blastes