Quand un gene est rapporteur

L ' introduction de gL, nes rappotteurs (repor/ers) dens les cel- lules est une methode d'~ude de I'expression des genes, qui

permet de me.surer I'induction de I'expression g~nique du rapporteur via les sequences re3ulatrices introduites darts le vecteur. Comme I'explique Promega, un des elements critiques pour bien eva- luer I'induction du gene rapporteur est I'efficacite de transfection des vecteurs/rapporteurs, car I'efftcadte de la transfection peut vatier de 0 & 100 % au cours d'une rn&ne manipulation, pour diverses raJ- sons mat~ielles, ce qui va influer sur I ' e ~ du g~e rapporteur. Un 'Z ge~,e rapporteur-contr&~r peut jouer le r~le de contrOle interne. Promega France propose deux genes r a p p o r t e u r s ~ m lucife- rase : le gene luc de luciole Photinus pyralis et le g~ne luc d'andmo- ne de mer Renilla reniformis, dans le flit DuaJ-Luc'rferase Reporter Assay System DLR ~. (335-1)

Mycobacteries en couleur L a lecture d'un prelevement bronchique

(crachats, coupes histologiques, colo- nies) sous microscope & fluorescence peut beneficier d'une detection facile et rapide des mycobact~ries en utilisant un colorant specifique. C'est une technique dotee d'une bonne sensibilit& Le kit RuO-ColOR RAL (selon Degommier) propose par Reactifs RAL est un produit colorant pret & I'emploi. I 'auramine est utilisee comme fluo- rochrome. Apres traitement & I'acide et & I'alcool, les mycobacteries gardent la colo- ration & I'auramine, le rouge thiazine etant utilise pour la contre-coloration. Les bacilles acido-alcoolo-resistants (BAAR) apparaissent colores en jaune-vert fluorescent sur le fond rouge de la prepara- tion. Chaque fois que des organismes flue- rescents sent deceles, il est necessaire de

confirmer la presence de BAAR en recolo- rant la lame par la technique de Ziehl- Neelsen. Une variante de celle-ci est la technique de ZiehI-Armand, qui permet de realiser simultanement la d~coloration de toutes les bacteries autres que mycobacte- ries et la coloration du fond (produits RAL : fuchsine de Ziehl, colorant d'Armand).

(335-2)

Transport de matieres infectleuses L a gamme d'emballages Viva X d'Area

Time est homologuee pour le transport de securite de matieres infectieuses d'ori- gine humaine ou animale. Conforme aux normes internationales en vigueur (y com- pris pour le transport ferroviaire et aerien), ils se composent de trois securites : embal- lage primaire (tube, flacon...), recipient etanche et hermetique, carton hydrophile. La gamme comprend egalement les modeles 5012 (500 mL), 5010 (15 L),

5013 (20 L) et le modele 5014, d'une capacite de 50 L, a ete developpe avec les professionnels de la filiere bovine pour le transport d'echantillons potentiellement infectes par I'ESB : c'est & ce jour le seul condi- tionnement homologue pour ce type de transport.

(335-3)

u gene & la proteine decryptage du geno- e humain vise A er chacun des genes onnels et sa fonction. ;'est une premiere etape: il faut ensuite

passer de la genomique &

la preteomique, __ ~ ...... ~ique fonctionnelle -

decouvrir la nature et la fonction de la proteine codee par tel gene. Avec le RTS 500, ou Rapid Translation System, Roche Diagnostics propose un systeme d'expres-

sion des proteines in vitro dont le principe repose sur le couplage in vitro de reactions de transcrip- tion et de traduction. Premier systeme d'expres- sion des proteines in vitro ~. echelle preparative, le RTS 500 permet en 6 ~ 24 heures d'exprimer la fonction du gene d'int~ret sous forme de 50 500 mg de proteine biologiquement active. Le gene d'interet est apport6 sous forme integree dans un plasmide ou sous une forme d'une matri- ce d'ADN lineaire obtenue awes amplification par PCR. Roche avait dej& ere simplifie cette derniere avec le LightCycler. Le RTS 500 automatise une procedure qui ouvre sur le traitement des mala- dies genetiques. (335-4)

Diagnostic rapide d'une insuffisance cardiaque L a decouverte des vasopeptides cardiaques

(ANP, BNP) remonte & plus de dix ans. Ce n'est que tres recemment que leur dosage plasmatique est possible. Cette decouverte suscita la surprise - le myocarde (oreillette, ventricule) devenait un orga- ne endocrinien - mais aussi I'espoir, ces peptides natriuretiques (stimulant I'excretion d'eau et de sel par le rein) etant susceptibles de corriger une insuf- fisance cardiaque debutante en cas d'HTA mal contrelee. Ainsi, BMD commercialise en France le test BNP Triage ® Biosite en immunofluorimetrie (domaine de mesure : 5 ~. 1300 pg/mL) sur sang total ou plasma recueilli sur EDTA. II permet d'obtenir un resultat en 15 minutes du taux de BNP (peptide natriuretique de type B). L'interOt du test tient au fait que, en cas d'HTA, le ventricule gauche auquel est oppose la resistance peripherique (pression g~nant I'expulsion du sang) tend ~. augmenter sa masse (hypertrophie) pour augmenter sa puissance d'ejection, qui finit par devenir inoperante. Une recente etude du CHI de Poissy/Saint-Germain-en-Laye (& paraitre) confirme que le taux de BNP augmente en cas d'insuffisance cardiaque congestive, son taux etant proportionnel & la gravite de la cardiopathie (reduction de la frac- tion d'ejection du ventricule gauche). (335-5)

Pour de plus amples renseignements, contactez la Revue en rappelant la rdfdrence.

82 Revue Fran?aise des Laboratoires, septembre 2001, N ° 335