Nutr. Clin. M~tabol. 1996 ; 10 : 53 S-56 S

Stabilit de ClinOl ic ® en m langes ternaires pour nutrition parent rale

Cather ine Ricard 1, J e a n - L u c Troui l ly 2, Maur ice Florent 1

1 L.aboratoire Fasonut, Montpellier. 2 Clintec technologies, Amilly.

La nouvelle 6mulsion lipidique injectable ClinO16ic ® fi base d'huile d'olive, originale par son apport en acides gras monoinsa tur6s (part icul i~rement en acide ol6ique), par son contenu en vitamines et autres composants mineurs (ou insaponifiable), pr6- sente de nombreux avantages en nutrition clinique [1]. En vue de son utilisation en pratique nutrition- nelle courante, il convenait de relever ses caract6ris- tiques physico-chimiques et d'etudier leur compati- bilit6 dans le cadre d'une incorporation en m61anges nutritifs complets. En effet, la forme gal6nique << 6mulsion >> utilis~e comme forme d'apport des lipides en nutrition pa- rent6rale est constitu6e d'un syst6me dispers6 huile/ eau thermodynamiquement instable, dont les condi- tions de stabilit6, assur~es par la pr6sence d'~mul- sionnants, sont int imement li6es ~i l'6quilibre des charges 61ectriques pr6sentes. Ainsi, la r6alisation d'un m61ange nutritif ternaire contenant une ~mulsion associ6e fi un certain nom- bre d'autres nutriments devra respecter la stabilit6 du syst6me dispers6 : tout facteur susceptible de modifier son ~quilibre de charges peut avoir une influence sur l'~volution de sa granulom6trie [2, 3]. - A cet ~gard, le pH et la force ionique du milieu sont les deux facteurs physico-chimiques principale- ment responsables de la d6stabilisation d'une 6mul- sion en m61ange. Les nutriments introduits dans le m~lange nutritif auront une influence sur la stabilit6 de ce dernier selon qu'ils en modiflent le pH ou la force ionique [4]. - D a r t s la formulat ion d 'un m61ange nutritif, un autre facteur peut intervenir sur la qualit6 gal6nique exig~e pour une administration par voie parent6rale : il s'agit de la nature de l'6mulsion lipidique de base, dont la granulom6trie, l'homog6n~it6 et l'6mulsion-

nant ont un r61e d6terminant sur la stabilitb ult6- rieure du m61ange dans le temps [5-7].

- E n dernier lieu, rappelons que les conditions de stockage sont essentielles pour le maintien de la stabilit6 du systbme dispers6. Le temps de conserva- tion et la temp6rature constituent des facteurs non n6gligeables dans le comportement des 6mulsions en m61ange. Une ~mulsion est un syst~me qui 6volue avec le temps et la temp6rature.

Granulom~tr ie de I '~muls ion Cl inOI6 ic ®

Dans un premier temps, la distribution granulo- m6trique de ClinO16ic ® a 6t6 6tudi6e parall61ement /t celle des diff~rentes 6mulsions lipidiques pures A 20% d6jfi commercialis6es : Iv61ip ®, Lipoven ®, Intralipide ® /t base d'huile de soja, et M6dialipide ® contenant 50% de triglyc6rides fi cha~nesmoyennes et 50 % de triglyc6rides fi cha~nes longues.

Les r6sultats obtenus par la m6thode de diffraction laser au moyen d 'un Coul ter LS 130 sont les suivants : la granulom6trie moyenne de ClinO16ic ® (340 nm) se r6v61e 6quivalente fi celle de Iv61ip ® (350 nm), inf~rieure fi celle de Lipoven ® (410 nm) et d'Intralipide ® (440 nm) et sup6rieure/t celle de M6- dialipide ® (300 nm). La distribution granulom6- trique des cinq 6mulsions montre un pourcentage de globules > 700 nm de 0,2 pour ClinOl~ic ®, Iv61ip ® et M~dialipide ®, de 2,1 pour Lipoven ® et de 6,3 pour Intralipide ®. Ces deux derni&es 6mulsions montrent une dispersion plus 6tal6e laissant appara~tre la pr6- sence de globules de taille proche ou sup6rieure au micron.

Correspondance : Dr C. Ricard, Laboratoire Fasonut, rue Valsi6re, 34090 Montpellier.

53 S

C. R I C A R D

Stabilite de ClinOl~ic ® en melanges nutritifs ternaires

E t u d e n ° 1

Quatre formulations standards de m61anges nutritifs ternaires complets pour adultes ont 6t6 r~alis6es chacune avec ClinO16ic ® et Intralipide ® : A1, A2, A3, A4. A1 et A2 se diff6renciaient par la nature de la solution d'acides amines, A3 et A4 par l 'apport en cations divalents (tableau I).

Tableau I : Tableau des formulations dtudides

A1/A2 A3/A4 F l l / F 1 2 M1-8

Volume en m L 2 500 2 040 3 000 2 000

Azote Vint6ne®/ Vint6ne®/ en g /L Vamine ~ 12 Vint6ne ® Vint6ne ® Vamine ® N

6 6 6 4,5

Glucose en g /L 110 125 112,5 100

intralipide®/ Endolipide®/

Lipide 50 25 53 Iv61ip®/ en g /L ClinO16ic®

25

Cations divalents en m m o l / L

4,8 10/16 2,4/4,8 3

Ces m61anges ~taient pr~par6s st6rilement, condi- tionn6s en poche EVA et s tock, s / t 4 °C. L'6tude de leur stabilit6 physique consistait en : - une observation visuelle de la survenue de la rup- ture de l '6mulsion et de l ' appar i t ion d 'hui le en surface ; - u n e observat ion microscopique des globules de taille sup6rieure/t 5 ~m ; - u n e no ta t ion globale pour l 'ensemble de trois mesures : examen de surface, examen au microscope optique, granulom6trie par photos6dimentation cen- trifuge. Cette notation 6value la qualit~ physique de l '~mulsion ; la norme retenue pour assurer une bonne stabilit~ de l'6mulsion doit ~tre sup~rieure /t 10 sur un maximum de 20 points de notat ion glo- bale. Les r6sultats sont les suivants : - L 'appari t ion de globules > 5 ~m et de la <~ rupture >> de l'6mulsion appara~t nettement plus tard dans les m~langes r~alis~s avec l '~mulsion ClinO16ic ® par

rapport fi ceux contenant Intralipide ®. La nature de la solution d'acides amines conditionne la dur6e de stabilit6 r~v616e sup6rieure avec Vint~ne ® par rap- port fi Vamine ®.

L'6volution de la notat ion globale avec le temps pour les trois formulations A1, A3, A4 confirme le meil leur c o m p o r t e m e n t des m61anges con tenan t ClinOl~ic ® compar6s /t ceux contenant Intralipide ®. La notat ion est encore dans les normes : * pour A1 apr~s 40 jours (5 jours avec Intralipide®), * pour A3 et A4 apr6s 20 jours (10 et 5 jours respectivement pour A3 et A4 avec Intralipide®). Cette premiere 6tude de ClinO16ic ® en m61anges ternaires stock6s /t 4 °C, en formula t ion adulte, confirme donc sa bonne stabilitY, r6v616e en outre meilleure que celle de l ' intralipide ®dans les m~mes conditions.

E t u d e n ° 2

Deux formulations standards F l l e t F12 (tableau I) distinctes par l 'apport en cations divalents ont ~t6 r6alis6es chacune avec les deux 6mulsions Iv61ip ® et ClinOl6ic ®. Les conditions de preparat ion et les m6- thodes d'~tude de la stabilit6 physique ~taient les m~mes que celles de l'6tude pr6c6dente, avec deux temp6ratures de stockage 4 °C et 25 °C. Les r6sultats montrent que la dur6e de conservation des m61anges F l l e t F12 r6alis6s avec ClinO16ic ® (sup@ieure/t 12 mois pour F l l e t 5 mois pour F12) est nettement plus longue qu'avec Iv61ip ® (3 mois pour F l l et 14 jours pour F12), sp~cialement dans les conditions r6elles de stockage r6frig~r6 fi 4 °C (/t 2 5 ° C : 35 et 21 jours pour F l l et F12 avec ClinOl~ic ® ; moins de 3 jours avec Iv61ip®). La stabilit6 de l '6mulsion ClinO16ic ® en m61ange semble encore meilleure que celle d'Iv61ip ® d6jfi consid~r6e comme une 6mulsion stable en m61anges ternaires.

E t u d e n ° 3

A partir d'une formule g6n~rale standard, huit m~- langes ternaires complets M I / t M8 ont @6 fabriqu6s en fa isant var ier l ' a ssoc ia t ion azote / l ip ides au moyen de deux solutions d'acides amin6s et de qua- tre 6mulsions lipidiques diff6rentes (tableau I). Apr~s pr6parat ion aseptique en poche EVA et stoc- kage /t 4 °C, l '6tude de la stabilit6 physique des m61anges consistait en : - une observation visuelle du cr~mage et de la coa- lescence, - un suivi du pH, - une mesure de la granulom&rie par spectroscopie de corr61ation de photons sur compteur Coulter N 4 M D A deux angles : 90 ° et 30 °.

54 S

STABILITI~ DE ClinO16ic ® EN MI~LANGES TERNAIRES POUR N U T R I T I O N PARENTI~RALE

Les figures 1 et 2 repr6sentent le temps de stabilit6 6valu6 par l 'apparition de la coalescence et de globu- les de diam6tre > 1 if.m, pour chaque m61ange r6alis6 avec les solutions de Vint~ne ® et de Vamine ®, asso- ci6es aux quatre 6mulsions lipidiques.

J= ¢o

z

8 0 " / / . . . . 2 7 7 n m

Intralipide ® Endolipide ® Ivelip ® Clinoldic ®

[ ] cr6mage sans coalescence • absence de globules > 1/~rn

Figure 1 • Appari t ion de coalescence et de globu- les > INn . Mdlanges avec VintOne ®

,m

20 ~ . . . . . 2&'5 n m :

Intralipide ~ Endolipide ® Ivelip ® Clinol~ic ~

[ ] cremage sans coalescence • absence de globules > 1pro

Figure 2 • Appari t ion de coalescence et de globu- les > l~u'n. M41anges avec Vamine ®

- L a granulom6trie des m61anges fi base de Clin- O16ic ® s'av6re la plus faible ainsi que la variabilit6 au cours de l'6tude, repr6sent6e par l'6cart-type (ET). - Associ~e/t la solution de Vint6ne ®, l'utilisation de l'~mulsion ClinO16ic ® prolonge nettement la stabilit6 du m61ange par rapport aux autres 6mulsions : au- cune d~stabilisation n'a ~t6 visible apr6s 60 jours de stockage ~i 4 °C. - A v e c la solution de Vamine ®, on note qu'Intrali- pide ® et Endolipide ® ne permettent qu'une conserva- tion de quelques jours. En revanche, malgr6 la pr6- sence de cette solution d'acides amin6s de pH acide,

le choix de l'6mulsion ClinO16ic ® permet de prolon- ger la stabilit6 par rapport aux autres 6mulsions. Par ailleurs, des essais de stabilit~ ont 6t6 r6alis6s en augmentant l 'apport de cations divalents de 3 fi 11 mmol/L. L'~mulsion ClinO16ic ® permet alors une stabilit6 jusqu'fi 10 jours de conservat ion, alors qu'avec les autres 6mulsions, ce d61ai ne d6passe pas 3 jours.

Etude de la floculation d'emulsions en presence de calcium

La floculation des 6mulsions lipidiques par addition de cations divalents est une des difficult6s majeures lors de la r6alisation des m61anges complets. La r~sistance /t la floculation de ClinO16ic ® 20 % apr~s addition de calcium a 6t6 6valu6e par la mesure du changement de viscosit6 de l'6mulsion non dilu6e (la viscosit6 augmente lorsque l'6mulsion lipidique flo- cule). Du CaCI2 (entre 0 et 10 mmol/1) a 6t6 ajout6 directement ~t l '6mulsion lipidique et la viscosit6 mesur6e par un viscosim~tre /t cylindres coaxiaux [81. Lorsque le calcium est ajout~, la floculation appara~t et la viscosit6 augmente jusqu'~t un maximum. Puis la floculation diminue et la viscosit6 redevient celle d'une 6mulsion non flocul6e. L'allure g~n6rale de la courbe obtenue peut ~tre caract6ris6e par trois param6tres : * [Ca]cri t : concentration critique en calcium provo- quant une augmentation significative de la viscosit6 ; * Vmax : valeur de la viscosit6 lors de la ttoculation maximale ; * [Ca]max : concentration en calcium induisant la floculation maximale. La stabilit6 d'une 6mulsion, 6valu6e par sa r~sistance /t la floculation, sera d'autant meilleure que les va- leurs de [Ca]cri t et [Ca]max sont plus 61ev6es et celle de Vma~ plus faible. Le comportement de l'6mulsion ClinO16ic ® a 6t6 compar6/t celui d'Iv61ip ® et d'Intralipide ® : -Cl inO16ic ® pr6sente des valeurs de [Ca]cri t et [Ca]max les plus importantes (3,5 et 5,25), et de Vma× la plus basse (1,7) ;

Intralipide ® pr6sente des valeurs de [Ca]cri t et [Ca]max les plus faibles (2 et 3,5), et de Vmax la plus 61ev6e (3,1) ;

Iv61ip ® pr6sente des valeurs interm6diaires : [Ca]cri t = 2,5 ; [Ca]max TM 4,75 ; Vm~x = 2,3. Parmi ces trois 6mulsions, ClinO16ic ® montre ici la meilleure r~sistance /t la floculation par ajout de calcium.

55 S

C. R I C A R D

Conclusion

Ces &udes r6alis6es dans diff6rentes cond i t ions d ' in- t r oduc t ion de l '6mulsion ClinOl6ic ® en m~langes nu- tr i t ifs d6mont ren t une tr6s bonne stabili t6 phys ique de cet te nouvel le 6muls ion en m61anges t e rna i r e s comple t s destin6s/~ l 'adul te .

Bibliographie

1. Granato D, Blum S, Malnoe A, Rossle C, Dutot G. Effet d'une 6mulsion lipidique parent6rale /t base d'huile d'olive (ClinO16ic ®) sur la prolif+ration des lymphocytes T in vitro. Nutr Clin M&abol 1995 ; 9 (suppl) : 192 (r6sum6).

2. Brown R, Quercia RA, Sigman R. Total nutrient admixture : a review. JPEN 1986 ; 10 : 650-8.

3. Chaumeil JC, Brossard D. Stabilit6 des 6mulsions lipidiques utilis~es en nutrition parent6rale. Nutr Clin M6tabol, 1993 ; 7 : 55-64.

4. Ricard C, Fortune R, Florent M, Bardet L. Impor- tance du pH et de la composition des solutions d'acides amin6s sur la stabilit6 des m61anges ternai- res pour nutrition parent6rale totale. Nutr Clin M6- tabol 1995 ; 9 : 3-13.

5. Georgin F, Ricard C, Fortune R, Florent M, Bardet L. Granulom~trie moyenne et homog6n~it6 de la fabri- cation des lipides: param6tres de stabilit6 pour la pr6paration des m61anges pour nutrition parent6rale totale? Nutr Clin M6tabol 1992 ; 6 : 27.

6. Mangin F, Brossard D, Chaumeil JC. Influence de la concentration en phospholipides d'une 6mulsion sur sa stabilit6 en m61anges nutritifs complets. Nutr Clin M6tabol 1992 ; 6 (suppl) : 28 (r~sum6).

7. Mangin F, Brossard D, Chaumeil JC. Influence de la composition de la 16cithine sur ses propri6t~s d'~mul- sification et de stabilisation. Nutr Clin M6tabol 1995 ; 9 (suppl) : 173 (r6sum6).

8. Trouilly JL, Gerbeau P, Guilleux L, Melin C. Ftoccu- lation assessment of ifitravenous fat emulsions in presence of calcium by means of viscosity measure- ment. Clin Nutr 1992; 11 (suppl.) : 34 (r6sum6).

56 S