TP CCM Essence Lavande

7/25/2019 TP CCM Essence Lavande

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Chimie : 2nde

Activit.4 : Chromatographie sur couche mince de lhuile essentielle de lavande

Objectifs :

Comprendre le principe de la chromatographie sur couche mince (CCM) et la raliser.

Sparer par CCM les constituants de l'huile essentielle de lavande (extraite au TP prcdent) et les identifier.

I. Principe de la chromatographie sur couche mince :

La CCMest une mthode permettant de sparer les constituants dun mlange et ventuellement de lesidentifier.Le mlange sparer est dabord dpos sur une ligne horizontale, appele ligne de dpt, sur une plaque (gel de silice encouche mince sur une plaque daluminium). Puis, il est entran par un solvant appropri qui migrepar capillarit sur la plaque.Les constituants du mlange se sparent par migration diffrentielle : cette opration sexplique par un doublephnomne :

Les constituants du mlange ont des solubilits diffrentes dans lluant : chacun dentre eux est dautantplusentran par lluant quil est soluble.

Les constituants du mlange sont absorbs diffremment sur gel de silice : ils ne sont pas retenus de la mme

manire par ce dernier.

Aprs migration, les tches doivent tre rvles.

II. Mode opratoire : voir fiche mthode en pages 2 et 3.

1. Matriel utilis : Cuve lution avec couvercle.

Eluant utilis : 20% dactate dthyle mlang 80%de cyclohexane). Dpts : nots X (pour lessence de lavande extraite par hydrodistillation lors du prcdent TP), A (pour le linalol),

et B (pour lactate de linalylecommercial). Trois micropipettes (ou 3 piques apritif).

Un sche-cheveux.

Une solution de permanganate de potassium 0,02 mol.L-1pour la rvlation.

2. Protocole exprimental :

Effectuer les diffrentes tapes dcrites dans la fiche mthode en pages 2 et 3.

Pour la rvlation de ltape4, plonger le chromatogramme dans la solution de permanganate de potassium, le sortir

et le rincer leau distille.Le scher et entourer les diffrentes tches.

III. Analyse du chromatogramme :

1. Quobservez-vous lors de llution ?2. On dit que la plaque et lluant sont 2 phases distinctes.

Quelle est la phase liquide ? Quelle est la phase solide ? Quelle est la phase mobile ? Quelle est la phase fixe ?

3. Que se passe-t-il pendant llution, lorsque lluant entre en contact avec les dpts sur la plaque ?4. Quobserve-t-on pour le dpt X ? En combien de tches sest-il dissoci ? Que peut-on dire de la solution X ?5. Mmes questions pour les dpts B et C.

6. Mesurer et noter la hauteur H parcourue par le solvant et la hauteur h atteint par chaque tche.

7. Lespce prsente dans une tche est caractrise par son rapport frontal Rf, dfini par R

f=

h

H.

Calculer le rapport frontal de chaque tche.

8. Sachant que deux corps prsentant le mme rapport frontal Rfsur la mme plaque sont identiques, indiquer quels

sont les constituants de lextrait de lavande que vous pouvez identifier.

Chimie : 2nde 1/3


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Chimie : 2nde

Fiche mthode : Ralisation dune chromatographie sur couche mince (CCM)

I. Premire tape : Prparation de la cuve lution

Voir schma ci-dessous

Ouvrir le flacon contenant lluant.Verser une hauteur denviron 5 mm dluant dans la cuve lution.Refermer le flacon.

Recouvrir la cuve laide du couvercle et attendre environ dix minutes. Pendant ce temps passer ltape 2.

II. Deuxime tape : Prparation de la plaque chromatographie

Tracer la rgle et au crayon papier, et sans appuyer, une ligne fine environ 1 cm du bord infrieure de la plaque.

A laide de traits fins, reprer les positions des dpts effectuer.

A laide dune micropipette dposer une goutte du mlange X analyser. En changeant chaque fois de micropipettefaire les deux dpts despces chimiques de rfrence A et B. Le dpt doit seffectuer par petites touchesbrves, de faon obtenir une tche de diamtre gal environ 2 mm.

A laide dun sche-cheveux, scher la plaque.

Chimie : 2nde 2/3

Eluant

12

3

4

1

2

3

4

1

2

3

4

Cuve lution

Bouchon

Couvercle

5 mm

1 cm X A B

4

2 31


3/3

III. Troisime tape : llution

Oter le couvercle de la cuve lution.

Introduire la plaque dans la cuve lution, sans toucher les bords.

Recouvrir la cuve avec le couvercle, et laisser llution seffectuer jusqu ce que le front du solvant se situe environ1 cm du sommet de la plaque.

IV. Quatrime tape : Rvlation et exploitation du chromatogrammeSortir le chromatogramme de la cuve et reprer le front du solvant laide dun trait horizontal

Scher la plaque.

Si les tches du chromatogramme restent invisibles, utiliser un moyen de rvlation adapte :

- Immersion dans une solution de permanganate de potassium

- Exposition aux vapeurs de diiode- Exposition aux rayons ultraviolets (UV)

Reprer les tches situes la mme distance de la ligne de dpt, et identifier les espces chimiques contenues

dans le mlange X. Calculer les rapports frontaux Rfpour chaque espce chimique : voir schma ci-dessous pour

lexemple du rapport frontal RfBde lespce chimique B.

Chimie : 2nde 3/3

X A B

X A B

1

X A B

2

1

2

3

3

2

2

1

1

X A B

X A B

3

H hB

RfB =hBH

3

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